精品文档---下载后可任意编辑APOB-100 mRNA 编辑的细胞异质性讨论的开题报告题目：APOB-100 mRNA 编辑的细胞异质性讨论讨论背景和讨论问题：低密度脂蛋白(LDL)是人体中主要的胆固醇载体，高水平的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)会增加心血管疾病的风险。由于低密度脂蛋白基因(APOB)编码的 ApoB-100 蛋白质在人体中 90％以上的 LDL 上表达，抑制 APOB-100 蛋白质的产生是治疗高胆固醇的有效策略。基于这个策略，讨论人员通过人工干预 APOB-100 mRNA 的编辑，已经发现了一些有效的基因编辑方法，例如 CRISPR-Cas9、RNA 编辑酶等。尽管这些技术显示了很高的潜力，但与这些技术相关的光学方法都不能直接区分编辑和非编辑的单细胞，这意味着现有的技术不能提供区分异质性的数据。可以预期，不同的细胞在进行 APOB-100 mRNA 的编辑方面会表现出不同的反应，这是影响治疗效果的重要因素。因此，有必要对 APOB-100 mRNA 编辑的细胞异质性进行讨论。讨论目标：本讨论旨在探究 APOB-100 mRNA 编辑的细胞异质性。我们的目标是建立一种可靠的技术来区分编辑和非编辑的单细胞，并使用该技术对编辑和非编辑的单细胞进行分析，以了解不同细胞对 APOB-100 mRNA 编辑的反应。讨论方法：构建基于 CRISPR-Cas9 技术的 APOB-100 编辑系统；构建结合普通 PCR 和数字 PCR 的单细胞条件下的 APOB-100 mRNA 编辑鉴定技术；通过该技术，筛选并分离单个编辑和非编辑细胞；对编辑和非编辑细胞进行 RNA 测序，分析它们对 APOB-100 mRNA 编辑的反应；使用生物信息学工具讨论差异表达的基因和激活的生物通路。讨论意义：精品文档---下载后可任意编辑本讨论将讨论 APOB-100 mRNA 编辑的细胞异质性，有助于深化理解对这种编辑方法的反应，这将是未来开展基于基因编辑的药物讨论的基础。此外，本讨论采纳的技术也有望被应用于其他基于基因编辑的药物讨论领域中。
