精品文档---下载后可任意编辑CDH4 基因真核表达载体的构建及其在鼻咽癌中的功能讨论的开题报告一、选题背景和意义CDH4 是一种胞间连接蛋白，舒适型脑室上皮细胞瘤和鼻咽癌患者中 CDH4 的表达明显增加。鼻咽癌是一种恶性肿瘤，具有较高的发病率和死亡率。因此，讨论CDH4 在鼻咽癌中的功能机制具有重要的临床意义。本讨论将构建 CDH4 基因真核表达载体，转染到鼻咽癌细胞中，探究 CDH4 在鼻咽癌中的功能及作用机制。二、讨论内容和讨论方法（一）讨论内容1、构建 CDH4 基因真核表达载体；2、将 CDH4 基因真核表达载体转染到鼻咽癌细胞株中；3、通过 Western blot 方法检测 CDH4 的表达水平，并比较转染组和对比组的差异；4、通过细胞增殖、侵袭、迁移等实验，讨论 CDH4 的表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响；5、通过 qPCR 检测 CDH4 的表达对其下游某些基因的调节作用。（二）讨论方法1、通过 PCR 扩增 CDH4 基因；2、构建真核表达载体，包括提取质粒、限制性酶切、连接、转化大肠杆菌、提取重组质粒等步骤；3、利用 Lipofectamine2000 将质粒转染到鼻咽癌细胞中；4、Western blot 方法检测 CDH4 的表达水平；5、MTT、Transwell 等实验方法检测细胞增殖、侵袭、迁移等指标；6、qPCR 检测 CDH4 的表达调节作用。三、预期结果和意义估计能成功构建 CDH4 基因真核表达载体，转染到鼻咽癌细胞中。通过实验结果可以发现 CDH4 在鼻咽癌细胞生物学行为中的重要性及作用机制，为鼻咽癌的诊断治疗提供新的思路和方法。
