精品文档---下载后可任意编辑EGFL7 抑制 NF-κB 核转位减少高氧诱导的内皮细胞凋亡的开题报告背景和意义：糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy, DR)是一种常见的糖尿病并发症，主要由于长期的高血糖导致视网膜的血管损伤所致。高氧诱导内皮细胞凋亡是 DR 发生和进展的重要机制。EGFL7 是一种与血管生成和肿瘤生成有关的细胞因子，其表达水平在高氧诱导的内皮细胞凋亡中起到了重要的作用，但其具体的调控机制尚不清楚。讨论目的：通过讨论 EGFL7 在高氧诱导内皮细胞凋亡中的作用机制，揭示其与NF-κB 核转位的关系，并探究其对 NF-κB 核转位的影响，以期为 DR 的治疗和预防提供新的思路。讨论方法：1.构建 EGFL7 的慢病毒表达载体从人体内皮细胞中提取 RNA，逆转录为 cDNA，利用 PCR 扩增EGFL7 的基因片段，将其克隆到慢病毒载体中，构建 EGFL7 的慢病毒表达载体。2.培育内皮细胞并高氧处理收集人体血管内皮细胞，分别加入慢病毒表达载体及对比载体进行感染，待细胞稳定表达后，进行高氧处理，利用 MTT 法检测内皮细胞的存活率。3.Western blotting 检测 NF-κB 水平及核转位收集细胞，在不同时间点进行蛋白抽取，并采纳 Western blotting方法检测内皮细胞 NF-κB 水平及其核转位情况。4.检测内皮细胞的凋亡率采纳 PI/Annexin V-FITC 双染法检测内皮细胞的凋亡率。讨论预期结果：EGFL7 能够抑制 NF-κB 核转位，并减少高氧诱导的内皮细胞凋亡。这一发现可能为 DR 的治疗和预防提供新的靶点和治疗方法。
