精品文档---下载后可任意编辑ETS1 基因沉默逆转 MCF-7ADR 多药耐药的实验讨论的开题报告一、讨论背景与意义多药耐药是肿瘤治疗中常见的问题,也是肿瘤患者治疗失败的主要原因之一。讨论表明,多药耐药与肿瘤细胞中特定基因的表达失调等因素有关。ETS1 基因作为一种转录因子,在多种肿瘤中表达异常,并且与肿瘤细胞的增殖、转移和耐药性等方面密切相关。因此,探究 ETS1 基因在多药耐药中的作用机制,对于寻找肿瘤治疗新靶点,提高治疗效果具有重要的意义。二、讨论内容本讨论将采纳质粒介导的 siRNA 技术沉默 MCF-7ADR 细胞中的ETS1 基因,观察 ETS1 基因沉默对 MCF-7ADR 细胞耐药性以及细胞增殖、转移能力的影响,并讨论 ETS1 基因沉默对多种耐药基因的表达变化及其调控机制。三、讨论方法1、建立沉默 ETS1 基因的 MCF-7ADR 细胞株:通过质粒介导的siRNA 技术,构建含有 ETS1 基因特异性 siRNA 的质粒,并将其转染到MCF-7ADR 细胞中,筛选出效果最佳的 siRNA 序列,建立沉默 ETS1 基因的细胞株。2、细胞增殖和转移能力的检测:采纳 CCK-8 法和 Matrigel 侵袭实验,测定沉默 ETS1 基因的 MCF-7ADR 细胞的增殖和转移能力。3、耐药基因的表达变化:利用 qRT-PCR 技术,检测沉默 ETS1 基因的 MCF-7ADR 细胞中多种耐药基因的表达变化。四、预期结果我们估计,ETS1 基因沉默可逆转 MCF-7ADR 细胞的多药耐药性,并抑制细胞增殖和转移能力。同时,ETS1 基因沉默可能通过影响多种耐药基因的表达,参加细胞的多药耐药性形成与进展。五、讨论意义本讨论有望为肿瘤治疗的新靶点的寻找提供重要线索,为寻找治疗耐药性的新策略提供理论依据,进一步拓展肿瘤治疗的可能性。