精品文档---下载后可任意编辑OPTN 突变影响 Htt 蛋白共域结合调控 RGC 细胞BDNF 表达的开题报告讨论背景:猎头蛋白(Htt)是尼日尔-荷兰脑脊髓炎(Huntington disease, HD)的发病基因，在正常情况下，Htt 通过与细胞膜、运输蛋白或储存蛋白等相互作用，参加多个信号通路，调节细胞生命周期、分化或存活等过程。而在 HD 患者中，由于 CAG 三核苷酸重复扩增，在 Htt 的 N-末端区域形成多聚体(aggregation)，导致神经退行性变和不可逆的神经元死亡。我们之前的讨论已经证明，Htt 有参加视网膜母细胞(rat retinal ganglion cells, RGC) 发育的作用，发现 Htt 会影响 BDNF 及其 TRKB 受体的表达，调节胶质细胞的分化及功能。但对于 Htt 和 BDNF 的调控机制尚未深化讨论，有待于进一步探究。讨论目的:本讨论旨在探究 Htt 与 BDNF 之间的相关性，以及 OPTN 突变是否会影响 Htt 与 BDNF 的相互作用，深化讨论 Htt 和 BDNF 在视网膜母细胞的共域结合作用及突变对其调节的影响，为 HD 的治疗提供有价值的临床思路。讨论内容:1.慢病毒载体构建: 构建 Htt 和 BDNF 的共表达载体，并设计 Htt 与BDNF 的分离载体。2.细胞实验: 利用 in vitro 的实验手段，分别将 Htt 与 BDNF 的共表达载体以及 Htt 或 BDNF 单独表达载体转染 RGC 细胞系中，并分别检测其对 BDNF 及 TRKB 的调节作用。同时来自 HD 患者的 RGC 细胞株被用于 OPTN 突变的 GFP 定位实验、共免疫共沉淀和荧光共振能量转移的分子生物学实验，以了解 OPTN 突变对 Htt 和 BDNF 之间相互作用的影响。讨论意义:本讨论将有助于深化讨论 Htt 与 BDNF 及其 TRKB 受体之间的关系，进一步阐明 Htt 对 RGC 细胞 BDNF 调节的分子机制，并且阐述了 OPTN突变对 Htt 和 BDNF 之间相互作用的影响，为 HD 治疗提供可靠的临床思路和讨论基础，有望为从头开发新的治疗策略提供方向。
