精品文档---下载后可任意编辑Sfi1p 功能性多肽与 Cdc31p 作用的讨论的开题报告蛋白质相互作用是细胞生命活动的重要基础，其中一部分重要的蛋白质相互作用是通过结构域之间的结合实现的。Sfi1p 是酵母细胞核膜孔的组分，具有多个重复结构域，其中一个被命名为 Sfi1p-N。此前曾报道Sfi1p-N 与细胞周期调控因子 Cdc31p 相互作用，这种相互作用在细胞周期中起到重要的调控作用。本讨论的目的是通过合成 Sfi1p-N 和 Cdc31p 结构域的功能性多肽来揭示其相互作用的机制。首先利用 PCR 技术扩增 Sfi1p-N 和 Cdc31p结构域的编码序列，分别克隆到表达载体 pET-28a(+)和 pGEX-4T-1 中，产生 His6-Sfi1p-N 和 GST-Cdc31p 融合蛋白。通过此方法大量筛选出高效纯化的 Sfi1p-N 和 Cdc31p 融合蛋白，并确定其用于后续实验的最佳取代量。接着，在此基础上利用固相合成的方法合成 Sfi1p-N 和Cdc31p 结构域的功能性多肽，通过小角度 X 射线散射和嵌段法光散射等技术来讨论这些多肽与蛋白质间的相互作用。本讨论的创新点在于将 Sfi1p-N 和 Cdc31p 结构域的编码序列克隆到表达载体中，通过高效纯化的方式来生成讨论 Sfi1p 和 Cdc31p 相互作用的试验平台，同时通过固相合成的方法来合成多肽并讨论其与蛋白质间的相互作用。该讨论可为进一步讨论细胞周期调控提供重要理论基础。
