精品文档---下载后可任意编辑siRNA 抑制 ZNF139 对人胃癌裸鼠原位移植瘤增殖影响的讨论的开题报告一、讨论背景胃癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一
尽管在治疗上取得了一些进展,但其治愈率依旧较低
因此,寻找治疗胃癌的新途径和新靶点尤为重要
ZNF139 是细胞核内的一个结构域转录因子,在多种肿瘤中均被发现高表达
此外,之前也有讨论发现 siRNA 抑制 ZNF139 可抑制人类结肠癌细胞增殖,并且降低了 ATP 含量、葡萄糖的利用和乳酸的产生,但其对胃癌的治疗效果尚未被讨论
二、讨论内容和目的本讨论旨在探究 siRNA 抑制 ZNF139 对人胃癌裸鼠原位移植瘤增殖的影响,以期为胃癌治疗的新策略的开发提供实验依据
具体讨论内容为:利用 siRNA 技术抑制 ZNF139 的表达,构建裸鼠胃癌原位移植瘤模型,检测 siRNA 抑制 ZNF139 对裸鼠胃癌原位移植瘤增殖和肿瘤相关蛋白表达的影响
三、讨论方法和技术路线1
裸鼠胃癌原位移植瘤模型的建立:采纳 BALB/c 裸鼠,将裸鼠脾细胞和 HGC-27 肿瘤细胞混合,注射于裸鼠的右侧腋下,建立裸鼠胃癌原位移植瘤模型
siRNA 转染:采纳 Lipofectamine 2000 试剂将设计的ZNF139 的 siRNA 转染到 HGC-27 细胞,并使用 Western blotting 分析 siRNA 转染后 ZNF139 蛋白表达的抑制率,选出最佳转染浓度
PCR 检测:使用 Real-time PCR 检测转染 siRNA 的细胞内ZNF139 mRNA 表达量
细胞生长抑制检测:使用 MTT 法检测 siRNA 转染对 HGC-27 细胞的生长状态影响
Western blotting 检测肿瘤相关蛋白的表达变化
同步检测裸鼠胃癌原位移植瘤的生长状态和肿瘤相关蛋白的表达变化