选修 3 现代生物科技专题知识点总结专题 1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体夕卜 DNA 重组 和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术 。（一）基因工程的基本工具1. “分子手术刀”一一限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2. “分子缝合针”一一 DNA 连接酶（1）两种 DNA 连接酶（E・coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶）的比较:① 相同点：都缝合磷酸二酯键。② 区别：E・coliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。⑵ 与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段 的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”一一载体（1）载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保存 。 ② 具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。③ 具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择 。 （2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒（二）基因工程的基本操作程序■第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2. 原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。3.基因文库包括基因组文库和 cDNA 文库。二者的区别：文库类型文库大小基因中是否有启动子基因中是否有内含子基因多少物种间基因交流cDNA文库小无无某种生物的部分基因可以基因组文库大有有某种生物的全部基因部分基因可以4.人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。5.PCR 技术扩增目的基因（1）PCR 是多聚酶链式反应的缩写，原理 DNA 双链复制 （2）过程：第一步变性:加热至 90〜95°C,DNA...
