抗血清制备及抗体效价测定

精品文档---下载后可任意编辑【实验过程】4Part . NDV Ⅰ抗血清制备 3一、实验原理 3二、实验仪器、材料和试剂 31. 仪器 32. 材料 33. 试剂 3三、方法和步骤 3（一）NDV 兔抗血清制备 31. 家兔捉拿方法 32. 家兔固定方法 33. 初次免疫 44. 二次免疫 45. 终末免疫 46. 试血 47. 颈动脉放血 48. 血清分离 59. 抗血清保存 5（二）NDV 鼠抗血清制备 51. 小白鼠的捉拿和固定 52. 初次免疫 53. 二次免疫 64. 终末免疫 65. 试血 66．放血 77．血清分离 78．抗血清保存 7Part . Ⅱ 琼脂双扩散实验检测抗体效价 7一、基本原理 7二、实验仪器、材料和试剂 71. 仪器 72. 材料 73. 试剂 8三、方法和步骤 81. 灭活鸡新城疫病毒 Ulster 2C 株抗原提取 82. 1%琼脂糖配制 83. 倒平板 84. 打孔 85. 稀释抗血清 86. 加样 87. 孵育 88. 结果观察 8Part . Ⅲ 酶联免疫吸附试验测定 NDV 抗血清效价 9一、基本原理 9二、实验仪器、材料和试剂 91. 仪器 92. 材料 93. 试剂 9三、方法和步骤 9Part . NDV Ⅰ抗血清制备Part . Ⅱ 琼脂双扩散实验检测抗体效价Part . Ⅲ 酶联免疫吸附试验测定 NDV 抗血清效价Part . Ⅳ 免疫印迹实验鉴定抗体的特异性精品文档---下载后可任意编辑1. 鸡新城疫病毒 Ulster 2C 株灭活抗原提取 92、抗原包被 93. 封闭 94. 洗板 95. 稀释抗血清 96. 加抗血清 107. 洗板 108. 加酶标二抗 109. 洗板 1010. 显色 1011. 终止 1012. 读数 1013. 结果判定 10Part . Ⅳ 免疫印迹实验鉴定抗体的特异性 10一、基本原理 10二、实验仪器、材料和试剂 101. 仪器 102. 材料 103. 试剂 11（1）SDS-PAGE 相关试剂：11（2）Western blotting 相关试剂：11三、方法和步骤 111. SDS-PAGE112. 转膜 123. 免疫检测 12（1）膜的封闭 12（2）洗膜 12（3）加入一抗 12（4）洗膜 12（5）与二级抗体作用：12（6）洗膜 12（7）Odessey 近红外成像仪扫描成像 12【实验结果及分析】13NDV 抗血清制备及抗体效价测定摘要：抗血清，新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）又称亚洲鸡瘟病毒、伪鸡瘟病毒或禽肺脑炎病毒。在病毒分类学中的位置属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒属（Paramyxovirus）中的一个种。该病毒主要危害鸡、珠鸡和火鸡，在被侵袭的鸡群中迅速传播，强毒株可使鸡群全...