实验一还原糖和总糖的测定姓名：李凯学号：5603115053一、实验目的1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理2、学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖
利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）
还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物，而氧化剂 3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量
由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以系数 0・9
三、实验材料和试剂1、实验材料面粉2、实验试剂① 1mg/ml 葡萄糖标准液② 3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂③ 碘-碘化钾溶液：④ 酚酞指示剂：⑤ 6MHCI 和 6MNaOH四、实验器材具塞玻璃刻度试管，50ml 离心管，100ml 烧杯，100ml 三角瓶，100ml 容量瓶，移液管：1ml；2ml；10ml，恒温水浴锅，离心机，天平，分光光度计
五、操作步骤1、制作葡萄糖标准曲线取 7 支具塞刻度试管编号，按表 1 分别加入浓度为1mg/ml 的葡萄糖标准液、蒸馏水和 DNS 试剂，配成加热+还曲撕»碱性〔‘川不同浓度的葡萄糖反应液
将各管摇匀，在沸水浴中准确加热 5min 取出，冷却至室温，用蒸馏水补足至 10ml,加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色
调波长 540
