核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准及常用试剂的配制

核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准及常用试剂的配制  一、核酸及蛋白质常用数据 1．核苷三磷酸的物理常数 化合物 分子量 λ max(pH7.0) 1 摩尔溶液（pH7.0）中λ max时的最大吸收值 OD280/OD260 ATP 507 259 15400 0.15 CTP 483 271 9000 0.97 GTP 523 253 13700 0.66 UTP 484 262 10000 0.38 dATP 494 259 15200 0.15 dCTP 467 271 9300 0.98 dGTP 507 253 13700 0.66 dTTP 482 267 9600 0.71 2．常用核酸的长度与分子量 核酸 核苷酸数 分子量 λ DNA 48502（双链环状） 3.0×107 pBR322 4363（双链） 2.8×106 28SrRNA 4800 1.6×106 23SrRNA 3700 1.2×106 18SrRNA 1900 6.1×105 19SrRNA 1700 5.5×105 5SrRNA 120 3.6×104 tRNA（大肠杆菌） 75 2.5×104 3．常用核酸蛋白换算数据 （1）重量换算 1μ g=10-6g 1pg=10-12g 1ng=10-9g 1fg=10-15g （2）分光光度换算： 1A260 双链 DNA=50μ g/ml 1A260 单链DNA=30μ g/ml 1A260 单链 RNA=40μ g/ml （3）DNA 摩尔换算： 1μ g 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端 1μ g pBR322 DNA=0.36pmol 1pmol 1000bp DNA=0.66μ g 1pmol pBR322=2.8μ g 1kb双链 DNA（钠盐）=6.6×105 道尔顿 1kb单链 DNA（钠盐）=3.3×105 道尔顿 1kb单链 RNA（钠盐）=3.4×105 道尔顿 （4）蛋白摩尔换算： 100pmol分子量 100，000 蛋白质=10μ g 100pmol分子量 50，000蛋白质=5μ g 100pmol分子量 10，000 蛋白质=1μ g 氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿 （5）蛋白质/DNA 换算： 1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质 10，000MW蛋白质=270bp DNA 30，000MW蛋白质=810bp DNA 50，000MW蛋白质=1.35kb 100，000MW蛋白质=2.7kb DNA 4．常用蛋白质分子量标准参照物 （1）高分子量标准参照 （2）中分子量标准参照 （3）低分子量标准参照 肌球蛋白 分子量 磷酸化酶 B 97，400 碳酸酐酶 31，00 肌球蛋白 212，000 牛血清白蛋白 66，200 大豆脻蛋白酶 21，500 β -半乳糖甘酶 B 116，000 谷氨酶脱氢酶 55，000 抑制剂 磷酸化酶 B 97，400 卵白蛋白 42，700 马心肌球蛋白 16，900 牛血清白蛋白 66，200 醛缩酶 40，000 溶菌酶 14，400 过氧化氢酶` 57，000 碳酸酐酶 31，000 肌球蛋白（F1） 8，100 醛缩酶 40，000...