大肠杆菌(E
coli)是使用最早的表达系统，其显著优点是易于操作，产量高，成本低，但由于用E
coli 生产的蛋白质药物因缺乏糖基化而在人体内易被降解，因此它的药放大大降低
此外，它还存在易产生内毒素和包涵体的问题
CHO 细胞属于成纤维细胞，既可以贴壁生长
也可以悬浮生长
容易发生基因突变，也较易进行基因转染，是良好的哺乳动物基因表达宿主细胞，代表性细胞有二氢叶酸还原酶（dihy drofolate redu ctase）营养缺陷型突变细胞株（CHO/dhfr-）、转染谷氨酰胺合成酶（Glu tamine sy nthetase,GS ）基因的GS-CHO 细胞
二 氢 叶 酸 还 原 酶 是 真 核 细 胞 核 苷 酸 生 物 合 成 过 程 中 起 着 重 要 作 用 的 一 种酶 ， 是 常 用 的 遗 传 选 择 标 记 之 一 ， 它 可 催 化 二 氢 叶 酸 还 原 成 四 氢 叶 酸
对 于 dhfr 突 变 体 细 胞 而 言 ， 由 于 不 能 够 合 成 四 氢 叶 酸 ， 阻 断 了 正 常 核 酸 代 谢 途 径 ， 因 此 不能 在 常 规 培 养 基 上 生 长 ， 但 若 在 培 养 基 中 加 入 次 黄 嘌 呤 （ hy pox anthine） 和 胸 苷 （ thy midine），则 突 变 体 细 胞 可 以 借 助 核 苷 酸 的 补 救 合 成 途 径 维 持 生 长
利 用 dhfr 基 因 进 行 筛 选 时 ， 首 先 将 重 组 DNA 分 子 导 入 dhfr- 表 型 的 受 体 细 胞 ， 然 后 撤 除 原培 养 基 中 的 的 次 黄 嘌 呤 和 胸 苷 ， 即 可 获 得 dhfr+并 能 表 达 外 源 基 因 的 克 隆 细 胞 系
因 此 在 挑 选 表 达 外 源 基 因 的 阳 性
