膜片钳实验技术入门------基本原理与操作 关 兵 才 李 国 华 刘 理 望 按：本文乃于2003 年根据较旧型号的仪器写成，后被《机能实验科学》 （郑先科主编，北大医学版，2006）收入。因新旧仪器基本原理和操作步骤大同小异，现对原文略作修改和标注，供同学们参考。 【 实 验 目 的 】 1. 了 解 膜 片 钳 技 术 的 基 本 原 理 和 操 作 。 2. 初 步 学 习 电 压 依 赖 性 离 子 通 道 电 流 的 基 本 记 录 方 法 。 【 实 验 原 理 】 一 、 膜 片 钳 技 术 原 理 简 介 膜 片 钳 (patch clamp) 是 一 种 主 要 用 于 检 测 细 胞 膜 离 子 通 道 活 动 的 电 生 理 技 术 ， 按 工 作方 式 可 区 分 为 电 压 钳 (v oltage clamp)和 电 流 钳 (cu rrent clamp)。 电 压 钳 是 最 基 本 的 工 作 方 式 ，即 对 细 胞 膜 电 位 进 行 人 为 控 制 ， 如 将 膜 电 位 钳 制 于 某 一 固 定 水 平 ， 或 在 此 基 础 上 再 施 以 阶 跃(step)式 或 斜 坡 式 (ramp)电 压 刺 激 ， 同 时 记 录 跨 膜 电 流 ， 从 而 分 析 细 胞 膜 通 道 的 活 动 。 电 流 钳即 人 为 控 制 经 微 电 极 对 细 胞 进 行 注 射 的 电 流 （ 等 于 离 子 通 道 电 流 与 细 胞 膜 电 容 电 流 之 和 ），同 时 记 录 膜 电 位 及 其 变 化 。 若 注 射 电 流 为 零 即 常 用 的 零 位 钳 流 ， 用 于 测 量 细 胞 膜 静 息电 位 ，若 注 射 方 波脉冲刺 激 电 流 ， 用 于 诱发、 观测 动 作 电 位 。 另外， 膜 片 钳 技 术 还常 用 于 观测 细 胞膜 电 容 , 从 而 推测 分 泌细 胞 的 活 动 情况。 下面主 要 介 绍其 电 压 钳 工 作 方 式 的 基 本 原 理 。（ 注：在 电 生 理 资料中， 因通 常 将 细 胞 外液和 记 录 系统的 “地”点相连作 为 参考点即 零 电 位 点， 所 以 电 位 和 电 压两 个 概 念 经 常 混 用 。） 根 据 膜 片 钳 实 验 中受 检 细 胞 膜 的 型 式 （ configuration） 不 同 ， 又 可 将 膜 片 钳...
