拟南芥基因克隆的策略与途径

拟南芥基因克隆的策略与途径拟南芥〔Arabidopsis thaliana〕是一种模式植物，具有基因组小〔125 Mbp〕、生长周期短等特点，而且基因组测序已经完成〔The Arabidopsis Genomic Initiative, 2000〕。同时，拟南芥属十字花科〔Cruciferae〕，具有高等植物的一般特点，拟南芥讨论中所取得成果很容易用于其它高等植物包括农作物的讨论，产生重大的经济效益，特别是十字花科中还有许多重要的经济作物，与人类的生产生活密切相关，因此目前拟南芥的讨论越来越多地受到国际植物学及各国政府的重视。基因(gene)是遗传物质的最根本单位,也是所有生命活动的根底。不管要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要讨论的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1、图位克隆Map-based cloning, also known as positional cloning, first proposed by Alan Coulson of the University of Cambridge in 1986, Gene isolated by this method is based on functional genes in the genome has a relatively stable loci, in the use of genetic linkage analysis or chromosomal abnormalities of separate groups will queue into the chromosome of a specific location, By constructing high-density molecular linkage map, to find molecular markers tightly linked with the aimed gene, continued to narrow the candidate region and then clone the gene and to clarify its function and biochemical mechanisms.图位克隆〔map-based clonig〕又称定位克隆〔positoinal cloning〕，1986 年首先由剑桥大学的 Alan Coulson 提出。用该方法别离基因是根据功能基因在基因组中都有相对较稳定的基因座，在利用别离群体的遗传连锁分析或染色体异常将基因伫到染色体的 1 个具体位置的根底上，通过构建高密度的分子连锁图，找到与目的基因紧密连锁的分子标记，不断缩小候选区域进而克隆该基因，并说明其功能和生化机制。用该方法别离基因是根据目的基因在染色体上的位置进行的，无需预先知道基因的 DNA序列，也无需预先知道其表达产物的有关信息。它是通过分析突变位点与分子标记的连锁关系来确定突变表型的遗传根底。近几年来随着拟南芥基因组测序工作的完成...