消毒与灭菌效果的评价方法和标准

中华人民共和国国家标准 消毒与灭菌效果的评价方法与标准 GB15981-1995Evaluating method and standard for the efficacy of disinfection and sterilization 第一篇 压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准1 主题内容与适用范围本方法规定了压力蒸汽灭菌技术标准及其评价灭菌效果的检测方法 本方法适用于对压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的评价。2 试剂 本标准所用试剂，凡未说明规格者，均为分析纯(AR)，水为蒸馏水。蛋白胨。葡萄糖。溴甲酚紫酒精溶液：取溴甲酚紫，溶于 100mL95%乙醇中。溴甲酚紫蛋白胨水培育基配制：蛋白胨，葡萄糖，溶于 1000mL 蒸馏水中，调pH 值至～，然后再加 2%溴甲酚紫酒精溶液，摇匀后，按 5mL/管，分装包口，置压力蒸汽灭菌器中，于 115℃灭菌 40min 后备用。3 指示菌嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC 7953 或 SSI K31)菌片，含菌量为 5×105～5×106cfu/片，121℃下，杀灭 90%微生物所需时间 D121 值为～，杀灭时间(KT 值)为≤19min，存活时间(ST 值)为≥。4 化学指示剂需用卫生部批准的化学指示剂。5 技术要求压力蒸汽灭菌器压力，MPa/cm2温度，℃灭菌时间，min下排气式1154012130预真空式1344-66 检测方法 生物学指标(用作压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的依据)。 将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。 灭菌柜室内，上、中层中央和排气口处各放置一个标准试验包(由 3 件平纹长 袖 手 术 衣 ， 4 块 小 手 术 巾 ， 2 块 中 手 术 巾 ， 1 块 大 手 术 巾 ， 30 块10cm×10cm、8 层纱布敷料包裹成 25cm×30cm×30cm 大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cm×13cm×6cm)代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封)，将盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。 经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育基中，56℃培育 48h，观察培育基颜色变化。化学指标在物品包外用化学指示胶带，可作为物品是否经过灭菌的处理标志。在物品包内中心部位用化学指示剂，可作为物品是否灭菌的参考标志。7 结果判定及评价 同次检测中，标准试验包或通气贮物盒内，每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培育基全部不变色，判定为灭菌合格。指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培育基由紫色变为黄色时，判定为灭菌不合格。...