基因工程练习

图 3图 4基因工程练习（一）回答下列有关基因工程问题.图 9 表示含有目的基因 D 的 DNA 片段长度(bp 即碱基对）和部分碱基序列，图 10 表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有 MspI、BamHI、MboI、SmaI 4 种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为 C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。1.若用限制酶 SmaI 完全切割图 9 中 DNA 片段,其产物长度分别为___________________________。若图 9 中虚线方框内的碱基对被 T—A 碱基对替换，那么基因 D 就突变为基因 d。从隐形纯合子中分离出图 9 及其对应的 DNA 片段，用限制酶 Sma I 完全切割，产物中共有_________种不同长度的 DNA 片段。2.为了提高试验成功率，需要通过_________技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝.该方法也是检测_________多样性的最简单方法。3.若将图 10 中质粒和目的基因 D 通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是_________。4.为了筛选出成功导入含目的基因 D 的重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在含_________的培育基上培育，得到如图 11 的菌落.再将灭菌绒布按到培育基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含_________的培育基上培育，得到如图 12 的结果（空圈表示与图 11 对比无菌落的位置）。请在图 11 中圈出一个含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落。5.在选出的大肠杆菌内基因 D 能成功表达的原因是___________________________。其表达产物是一条多肽链，如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为_________。(二)回答下列有关基因工程的问题图 1 表示含有目的基因 D 的 DNA 片段长度（bp 即碱基对)和部分碱基序列,图 2 表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有 MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4 种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为 C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题：6.用图 1 中的外源 DNA（含有目的基因 D)和图 2 中的质粒构建重组质粒需要使用限制酶和_________.前者（酶）的专一性很强，其作用特点是_____________________________________________。7.应该使用限制酶 BamHⅠ 同时处理质粒、外源 DNA，而不选择其他 3 种,原因在于( ）.(多选）A。若使用 SmaⅠ 或者 MspⅠ 会破坏目的基因。B. 若使用 SmaⅠ 切割质粒,能成功切开质粒得到粘性末端的可能很低。C。 若使用 MboⅠ 切割质...