工作菌液储存期限验证心得

1工作菌液贮存时间验证方案1. 目的：确认工作菌液在 2-8°C 条件下的贮存时间。2. 范围：适用于金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉的工作菌液贮存。3. 环境条件要求：所有检查在环境洁净度 10000 级下的局部 100 级洁净度的单向流空气区域隔离系统内进行，其全过程严格遵守无菌操作，能防止微生物再污染。4. 验证方法的依据：《中国药典》2010 年版二部。5. 验证前准备：5.1 验证用菌种金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]大肠埃希菌[CMCC(B)44102]生抱梭菌[CMCC(B)64941]黑曲霉[CMCC(F)98003]5.2 培养基的制备：营养肉汤培养基批号:硫乙醇酸盐流体培养基批号:营养琼脂培养基批号:改良马丁琼脂培养基批号:改良马丁培养基批号:玫瑰红钠琼脂培养基批号:铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]枯草芽抱杆菌[CMCC(B)63501]白色念珠菌[CMCC(F)98001]北京三药科技开发公司北京三药科技开发公司北京三药科技开发公司北京三药科技开发公司北京三药科技开发公司北京三药科技开发公司§中，加塞，按经过验证合格的灭菌程序进行灭菌，培养基的适用性检查应符合规定。5.3 稀释液的制备：0.9%无菌氯化钠溶液：取氯化钠 9.0g，加水溶解至 1000ml，121C 灭菌 20min。0.05%聚山梨酯 80 无菌氯化钠溶液：取土温 800.5ml，加 0.9%无菌氯化钠溶液至1000ml,121C 灭菌 20min。5.4 菌原液制备：(1)将金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽抱杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物分别接种至营养肉汤培养基中，经 30-35C 培养 18-24 小时。2(2)将生抱梭菌的新鲜培养物接种至硫乙醇酸盐流体培养基中，经 30-35°C 培养 18-24小时。(3) 将白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基中，经 23-28C 培养 24-48 小时。实验人/日期：(4) 接种黑曲霉的新鲜培养物接种至改良马丁琼脂斜面培养基上，23〜28C 培养 5〜7 天,加入 3〜5ml 含 0.05%(ml/ml)聚山梨酯 80 的 0.9%无菌氯化钠溶液，将抱子洗脱。然后,采用适宜的方法吸出抱子悬液至无菌试管内，备用。实验人/日期：6•验证内容：6.1 菌种的确认菌种名称代数编号接种日期实验人员金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌大肠埃希菌枯草芽抱杆菌生抱梭菌白色念珠菌黑曲霉6.2 仪器设备：实验中所用的玻璃仪器及金属器皿在使用前均经过 170—180C 干热灭菌至少 60 分钟。隔水式恒温培养箱：生化培养箱：立式压力蒸汽灭菌器：天平：GRP—9050 型SHP-250 型...