液相色谱培训讲义

液相色谱培训讲义(十)x 转载自： 发布日期：2024-5-22第十一章 柱子的应用与维护 色谱柱的液相色谱系统获得分离的中心部件，许多分离问题都归结于色谱柱。对柱注意适当的维护，则可缓解许多故障的发生。 柱故障主要是由机械、色谱或者化学方面的原因引起的。维护色谱柱和排除故障，；需要懂得液相色谱的分离过程以及色谱柱本身的构造是非常重要的。色谱柱的价格昂贵，应避开人为地损坏，并尽可能延长其寿命。一、色谱柱的种类与评价 一般地说，根据样品的性质决定采纳何种液相色谱方法，然后再选择不同类型的柱。即不同类型的柱则代表了不同的色谱方法。 不同种类色谱柱的差异在于柱结构、柱填料和柱尺寸的不同。 色谱柱有不同的尺寸(长度和内径)，分制备型、常规分析型和微型。不同类型柱的硬件也不同，(包括接头、柱管等方面)，还有径向加压柱和夹套加热柱等。 不同液相色谱法的尺寸根据需要可以选取，普通分析 3～30cm 长，内径 4～8mm。常用20cm 长、4.6mm 内径的柱。制备型柱内径一般为 8mm、25cm 长。微型柱内径 l～3mm，长 10～20cm。不同的填料分析的效果可能不同，这是因为生产过程不同所致。同一厂商生产的同种填料因批号不同也会有差异，这种差异可能从基质就开始(表面积、杂质、特别处理)，还有键合的化学物质(一氯或三氯硅烷反应剂)，不同厂家生产的填料还会因专利技术(预处理、键合过程、填装技术)等不同而呈现较大差异。由于种种差异、仅能假设同一批号的柱有基本相同的性质。 多数柱填料基质采纳多孔硅胶微粒，通常有球形和无定形两种，具有不同的粒度、孔径和表面积。多孔聚合物微粒也适用于反相色谱。聚合物柱的流动相范围广，流动相 pH 值可在 1 至一三之间。而硅胶基质 pH 仅能在 2.5 和 7 之间。显然，聚合物柱要好一些，但目前仍是以硅胶基质的柱为主。原则上，聚合物柱可以克服硅胶基质柱的某些不足，但需要大量的实验来证实，要进一步考查聚合物基质填料的全面优越性。 在实际工作中，选择性能良好的柱可得到好的结果，首先要注意柱径、长度、填料种类和填料粒度。 评价柱的好坏不仅只是 N 数，还应考虑组分在柱上的保留、键合相表面的物性、柱压降以及峰不对称因子 As 等。每一根新柱都应标出详细参数，主要内容包括公司名称、柱名称(商标)、柱填料、尺寸。附一张标准参考色谱图，并标出色谱条件、样品名称、流动相组成、流速、柱温、进样体积、检测器、峰的保留时间及峰名称等。评价...