黄芪叶中黄芪甲苷含量测定论文

黄芪叶中黄芪甲苷含量测定论文 黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿托毒等功效.黄芪药用价值很高，临床上常用来治疗非特异性免疫功能低下、乙肝和心血管系统疾病.黄芪甲苷作为黄芪成分之一，它具有降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆 CAMP 含量，促进小鼠再生肝 DNA 合成和增强免疫功能等多种作用.因此在讨论黄芪过程中，我们对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法讨论，本文用HPLC 法 测 定 黄 芪 甲 苷 的 含 量 ， 其 样 品 浓 度 的 范 围 在 0.01 ～0.2mg/ml 之间与峰面积呈线性，该法灵敏度高，重现性好，可准确地测定黄芪甲苷的含量。 1 仪器与试剂 Waters 高效液相色谱仪：包括 510 型泵，991 光电二极管阵列型检测器，U6K 型进样器；NECPowerMate 型计算机，黄芪甲苷标准品购自辽宁省药品检验所。甲醇、正丁醇为分析纯，乙腈为色谱纯、水为去离子水。试验用黄芪叶 6 月份采自沈阳医学院草药园。 2 方法与结果 2.1色 谱 条 件 色 谱 柱 为NucleosilC18柱(4.6mm×250mm ， 5μm); 流 动 相 为 乙 腈 - 水 ＝ 1∶2 ； 流 速 为0.8ml/min；检测波长为 205nm；速度为 0.4mm/min。 2.2 标准曲线制作精密称取黄芪甲苷标准品 2.128mg，加流动相定容至 2ml，配制成 1.064mg/ml 的标准品溶液，分别以10、20、30、40、50μl 进样测定，以峰面积对进样量作线性回归，得回归方程为 Y＝－5.6×10-5＋6.9365×10-4X(Y 为峰面积，X 为黄芪甲苷量)，r＝0.9994，黄芪甲苷标准品在 10.64～53.20μg 范围内与峰面积呈良好线性关系。 2.3 提取方法的选择用 3 种不同提取方法(索氏提取器提取1h；80℃温浸提取 1h 和超声波提取 1h)提取样品，后 2 种提取方法测得黄氏甲苷含量略低，故选索氏提取器提取方法。 2.4 流动相的选择实验试用多种溶剂系统，最后确定以乙腈-水＝1∶2 为流动相，黄芪甲苷分离效果最好，保留时间也较适宜。色谱图见上图 2(ABC)。 2.5 样品液制备将黄芪叶阴干后研成粉过 40 目筛，然后精密称取 5.00g，放置索氏提取器中，用 100ml80%甲醇加热提取 2h，提取液减压蒸去甲醇，用 20ml 正丁醇分别萃取 3 次，合并正丁醇萃取部分，减压蒸干，残渣用重蒸甲醇定容至 2ml，用 0.45μ 微孔滤膜过滤，滤液用于 HPLC 分析，每次进样 10μl。.6 加样回收率试验称取黄芪叶粉 5.00g5 份，分别精密加入黄芪甲苷标准...