酵母培养操作规程

本文主要介绍酵母的选育、保种、培养的操作工艺等。目录第一章酵母扩培（）§11 实验室扩培（）1 培养基制备（）接种操作（3）§1 生产现场扩培（5）1 准备工作（5）汉生罐接种操作（5）3 扩大罐扩培（5）二次（车间）扩大罐扩培（）第二章菌种保藏（）1 实验室菌种保藏与活化（）汉生罐菌种保藏与活化（）第三章酵母检测（8）§31 取样（8）1 扩培液、发酵液及待滤酒等的取样（8）酵母泥的取样（8）§3 检测（10）1 酵母细胞形态检测（10）酵母细胞大小测定（10）3 酵母泥外观检测（11）酵母细胞数和出芽率的测定（血球计数板法）（11）5 酵母死亡率的测定（血球计数板法）（1）酵母肝糖染色法（13）酵母凝聚性的测定（1）8 酵母死灭温度的测定（15）酵母发酵失重实验（1）10 酵母的呼吸缺陷型检测（1）第一章酵母扩培§11 实验室扩培【试剂】：冷麦汁、蒸馏水、新鲜鸡蛋。【器具】：试管（15X150）及（18X180）、小巴氏瓶（三角瓶）、大巴氏瓶（大三角瓶）、卡氏罐、中速滤纸、电炉、量筒、不锈钢锅、糖度计等。【仪器】：杀菌锅、天平（精度 01）。【方法】〖试管、三角瓶及巴氏瓶培养基的制备〗①取样：取糖化冷却麦汁，视麦汁浊度情况判定是否进行过滤。2°C,按每 0.5~l 使用一个鸡蛋的比例，加入打成泡沫的蛋清，在不断地搅拌下保温 30；然后升温煮沸 30；将煮沸后的麦汁用水浴冷至 80~90C，用双层中速滤纸过滤。土②澄清：将麦汁加热至 50.2°P。土③调糖：将过滤后的麦汁用蒸馏水调整糖度为 11④分装：试管（15X150）5，试管（18X180）10,分装小巴氏瓶（三角瓶）、大巴氏瓶（大三角瓶）。⑤灭菌：分装后包扎好，115C 杀菌 20；杀菌后培养基放置 2~3 天，确定无菌后备用。〖卡氏罐培养基的制备〗取糖化冷却麦汁（有条件的可取薄板前热麦汁）加入卡氏罐，然后封闭卡氏罐取样口,各呼吸阀等接口处均应以棉塞或呼吸阀进行封闭后包扎结实，115C 杀菌 30~0，于室温冷却至 17~18C；接种前以 3 的速率充纯氧 2~3（卡氏罐有效容积 20）。2 接种操作【器具】：酒精灯、酒精棉、剪刀、接种针、镊子、定量移液器或吸管等。【仪器】：超净工作台等。【方法】无菌室使用前，使用紫外线灯照射 20~30 分钟进行杀菌；进入无菌室换无菌工作服；所有操作采用无菌操作。〖活化〗①操作前将冷冻管菌种置于室温下，使之内部培养基达到室温后，振荡均匀；无菌操作，将冷冻管内的培养液全部转入盛有 5 培养基的试管中，于 2...