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列当中苯乙醇苷类成分的含量测定

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工作站,Thermo Fisher);TU-1901 双光束紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器公司);AL240 分析天平(梅特勒-托利多仪器厂);KQ-500DE 超声仪(昆山市超声仪器厂)。1.2 试剂毛蕊花糖苷和 crenatoside 为实验室自制,经 MS,H1-和 C13-NMR 确定结构,HPLC 峰面积归一化法测得纯度均大于 98%,乙腈(美国 Fisher 公司,色谱纯),水为娃哈哈纯净水,其他均为分析纯。1.3 药材列当药材为内蒙古各地采集,经内蒙古医科大学王素巍讲师为列当 O. coerulescens 的全草。2 方法与结果2.1 HPLC 测定毛蕊花糖苷和 crenatoside 的含量2.1.1 色谱条件 Inertsil ODS-RP HPLC 色谱柱(4.6 mm ×250 mm , 5 mμ);流动相为乙腈-0.l%磷酸水溶液(2278∶);检测波长为 330 nm;柱温 30 ℃;流速 1 mL·min-1,进样量 10 Lμ ,色谱图见图 1。2.1.2 对比品溶液制备 取减压干燥至恒重的对比品适量,分别精密称定,加入甲醇溶解制成每 1 mL 含毛蕊花糖苷 0.52 mg,crenatoside 0.53 mg 的对比品溶液 A、B,精密吸取A、B 对比品溶液各 1.0 mL,置 5 mL 量瓶中,甲醇定容,制备成混合对比品溶液 C。保存于 4 ℃的冰箱,备用。2.1.3 供试品溶液制备 列当粉末(过 40 目筛)约 0.1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 70%甲醇溶液 25 mL,称定质量,浸泡 1 h 后,超声(功率 500 W,频率 40 kHz)提取 30 min,冷却后补足失重,摇匀,静置,滤过,取续滤液即得。2.1.4 线性关系考察 分别精密吸取混合对比品 C 溶液 1,2,5,10,20,30 Lμ 以及单一对比品 A 溶液 10,12,16 Lμ 注入液相色谱仪,测定,以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方程。结果表明毛蕊花糖苷在 0.104~8.320 gμ 线性关系 良好, 回归方程为 Y=20.056X-0.483,r=0.999 9;crenatoside 在 0.106~3.180 gμ 线性关系良好,回归方程为 Y=20.182 X+0.025,r=1.000 0。2.1.5 精密度试验 精密吸取供试品溶液,连续进样 6 次,记录色谱峰面积。结果毛蕊花糖苷,crenatoside 峰面积的 RSD 分别是 0.23%,0.39%,表明仪器精密度良好。2.1.6 重复性试验 取同一份供试样品粉末 6 份,精密称定,按 2.1.3 项下方法平行制备供试 品溶液,连续进样,记录色谱峰面积。 结果毛蕊花糖苷、crenatoside 峰面积的 RSD 分别为 1.0%,1.3%,表明...

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