油茶子饼粕多糖的降血糖活性讨论工程有限责任公司;链脲佐菌素(STZ)、胰岛素(INS)ELISA 检测试剂盒购自 Sigma 公司;格列本脲片(2
5mg/片)购自天津太平洋制药有限公司;丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定试剂盒购自中国南京建成生物讨论所;生理盐水购自山东康宁药业有限公司;柠檬酸和柠檬酸钠购自国药集团化学试剂有限公司
1 高血糖小鼠模型的建立1)试剂的配制
①柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的配制
精确称取 2
1g柠檬酸置于 100mL 容量瓶中,加入去离子水定容,配制得溶液 A;精确称取2
94g 柠檬酸钠置于 100mL 容量瓶中,加入去离子水定容,配制得溶液B
② STZ 溶液的配制
分别量取 28mL 溶液 A、22mL 溶液 B 置于 100mL 容量瓶中,加入去离子水定容,得溶液 AB 的混合液,即为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,pH4
称取一定量的 STZ,用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解STZ,使得溶液中 STZ 浓度为 2%
STZ 溶液不宜存放,现配现用
2)造模方法
健康雄性昆明小鼠,预分组并标号,保持室温 25℃,正常昼夜交替下普通饲料适应饲养一周,随机取 15 只小鼠,禁食 12h(自由饮水),测定空腹血糖值,作为小鼠的基础血糖值
取 8 只小鼠作空白对比组(NC),正常饲养
剩余小鼠禁食 24h(自由饮水),腹腔注射STZ(用前新奇配制)造模,小鼠 120mg/kgBW
5~7d 后小鼠禁食12h(自由饮水),尾静脉取血,测定造模小鼠空腹血糖值,血糖值>16
8mmol/L 且出现明显“三多一少”症状(即多食、多饮、多尿及体重减轻)的小鼠即为高血糖模型成功的小鼠[19]
2 成模小鼠的分组及给药 取造模成功的小鼠 40 只,随机分为5