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油茶子饼粕多糖的降血糖活性研究

油茶子饼粕多糖的降血糖活性研究_第1页
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油茶子饼粕多糖的降血糖活性讨论工程有限责任公司;链脲佐菌素(STZ)、胰岛素(INS)ELISA 检测试剂盒购自 Sigma 公司;格列本脲片(2.5mg/片)购自天津太平洋制药有限公司;丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定试剂盒购自中国南京建成生物讨论所;生理盐水购自山东康宁药业有限公司;柠檬酸和柠檬酸钠购自国药集团化学试剂有限公司。1.2 方法1.2.1 高血糖小鼠模型的建立1)试剂的配制。①柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的配制。精确称取 2.1g柠檬酸置于 100mL 容量瓶中,加入去离子水定容,配制得溶液 A;精确称取2.94g 柠檬酸钠置于 100mL 容量瓶中,加入去离子水定容,配制得溶液B。② STZ 溶液的配制。分别量取 28mL 溶液 A、22mL 溶液 B 置于 100mL 容量瓶中,加入去离子水定容,得溶液 AB 的混合液,即为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,pH4.5。称取一定量的 STZ,用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解STZ,使得溶液中 STZ 浓度为 2%。STZ 溶液不宜存放,现配现用。2)造模方法。健康雄性昆明小鼠,预分组并标号,保持室温 25℃,正常昼夜交替下普通饲料适应饲养一周,随机取 15 只小鼠,禁食 12h(自由饮水),测定空腹血糖值,作为小鼠的基础血糖值。取 8 只小鼠作空白对比组(NC),正常饲养。剩余小鼠禁食 24h(自由饮水),腹腔注射STZ(用前新奇配制)造模,小鼠 120mg/kgBW.ip。5~7d 后小鼠禁食12h(自由饮水),尾静脉取血,测定造模小鼠空腹血糖值,血糖值>16.8mmol/L 且出现明显“三多一少”症状(即多食、多饮、多尿及体重减轻)的小鼠即为高血糖模型成功的小鼠[19]。1.2.2 成模小鼠的分组及给药 取造模成功的小鼠 40 只,随机分为5 组,加上正常小鼠的空白对比组,总计 6 个组,进行每天灌胃试验,灌胃时间持续 4 周,保持正常昼夜交替,室内温度在 25℃,室内通风良好,室内相对湿度维持在 45%~65%,小鼠每日正常饮水摄食。第一组(n=8):正常对比组,正常小鼠,给予正常饮水摄食,灌胃等量生理盐水 4 周。第二组(n=8):糖尿病阳性对比组,血糖值>16.8mmol/L,糖尿病成模小鼠,每日给予正常摄食饮水,灌胃等量生理盐水 4 周。第三组(n=8):格列本脲阳性对比组,血糖值>16.8mmol/L,糖尿病成模小鼠,每日给予正常摄食饮水,灌胃 10mg/(kg·d)格列本脲片 4周。第四组(n=8):多糖低剂量组,血糖值>16.8mmol/L,糖尿病成模小鼠...

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