12014 高中生物 基因工程导学案 中途版选修 3一、基因工程的概念基因工程的别名基因拼接技术、DNA 重组技术、转基因技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA 分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果符合人类需要的新的生物类型和生物产品二、DNA 重组技术的基本工具1、分子手术刀——限制性核酸内切酶，又称限制酶 （1）来源：这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的；（2）作用特点：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。（3）DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段，末端通常有两种形式，即 和 。例题 1 下列关于限制酶的说法正确的是（ ）A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C、不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键2、分子缝合针——DNA 连接酶（1）可把限制酶切下来的 DNA 片段拼接成新的 DNA 分子，即恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（2）根据 DNA 连接酶的来源不同，可以将它分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为coliE DNA 连接酶。coliE DNA 连接酶只能将双链 DNA 片段黏性末端连接起来，不能将双链 DNA 片段平末端之间进行连接。另一类是从 T4噬菌体中分离出来的，称为 T4DNA 连接酶。T4DNA 连接酶既可以“缝合”双链 DNA 片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链 DNA 片段的平末端，但连接平末端之间的效率比较低。例题 2 依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是 （ ）A．切断 a 处的酶为限制核酸性内切酶 B．连接 a 处的酶为 DNA 连接酶C．切断 b 处的酶为解旋酶 D．切断 b 处的为限制性内切酶要将目的基因与载体连接起来，在基因操作上应选用( )A．只需 DNA 连接酶 B．同一种限制酶和 DNA 连接酶C．只需限制酶 D．不同的限制酶与 DNA 连接酶【解析】要将目的基因与载体连接起来，应选用同一种限制酶切割目的基因和载体，两者暴露出相同的黏性末端，用 DNA 连接酶连接时，碱基之间才会按碱基互补配对形成氢键，相邻两个脱氧核苷酸之间在 DNA 连接酶的作用下形成磷酸二酯键。如图表示限制性内切酶切割某 DNA 分子的过 程，下列有关叙述，不正确的是( )12A．该限制酶能识别的碱基序列是 GAATTC，切点在 G 和 A 之...
