12014 高中生物 基因工程导学案 中途版选修 3一、基因工程的概念基因工程的别名基因拼接技术、DNA 重组技术、转基因技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA 分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果符合人类需要的新的生物类型和生物产品二、DNA 重组技术的基本工具1、分子手术刀——限制性核酸内切酶，又称限制酶 （1）来源：这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的；（2）作用特点：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开
（3）DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段，末端通常有两种形式，即 和
例题 1 下列关于限制酶的说法正确的是（ ）A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C、不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键2、分子缝合针——DNA 连接酶（1）可把限制酶切下来的 DNA 片段拼接成新的 DNA 分子，即恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
（2）根据 DNA 连接酶的来源不同，可以将它分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为coliE DNA 连接酶
coliE DNA 连接酶只能将双链 DNA 片段黏性末端连接起来，不能将双链 DNA 片段平末端之间进行连接
另一类是从 T4噬菌体中分离出来的，称为 T4DNA 连接酶
T4DNA 连接酶既可以“缝合”双链 DNA 片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链 DNA 片段的平末端，但连接平末端之间的效率比较低
例题 2 依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是 （ ）A．切断 a 处的酶为限制核酸性内切酶 B．连接 a 处的酶为 DNA 连接酶C．切断 b 处的酶为解旋酶 D．切断 b 处的为限制性内切酶要将
