辅助降血糖作用检验方法1 动物实验1、1 动物选择选用健康成年动物,常用小鼠(25±2g)或大鼠(180±20g),单一性别,大鼠每组 812 只、小鼠每组 1015 只。1、2 材料1、2、1 试剂四氧嘧啶(或链脲霉素)小鼠 3550mg/kg、bw、iv(100160mg/kg、bw、ip)、大鼠 5080mg/kg、bw、iv(202550mg/kg、bw、ip)用新奇配制。血溏测定试纸或试剂盒。1、2、2 仪器血糖仪、全自动生化仪、721B 型分光光度计。1、3 剂量分组及受试样品给予时间设 1 个溶剂对比组与 3 个受试样品剂量组,根据人体每日每公斤体重推举摄入量,小鼠扩大10 倍作为其中一个剂量组(大鼠扩大 5 倍),根据受试样品得具体情况另设两个剂量组。受试样品给予时间原则上不少于 30 天,也可根据实验需要自行设定期限。1、4 实验方法1、4、1 降低空腹血糖实验1、4、1、1 高血糖模型动物1、4、1、1、1 原理四氧嘧啶(或链脲霉素)就是一种 β 细胞毒剂,可选择性地损伤多种动物得胰岛 β 细胞,造成胰岛素分泌低下引起实验性糖尿病。1、4、1、1、2 造型动物禁食 24 小时后,给予四氧嘧啶造型,57 天后禁食 35 小时,测血糖,血糖值 1025mmol/L 为高血糖模型成功动物。1、4、1、1、3 操作步骤选高血糖模型动物按禁食 35 小时得血糖水平分组,随机选 1 个模型对比组与 3 个剂量组(组间差不大于 1、1mmol/L)。剂量组给予不同浓度受试样品,模型对比组给予溶剂,连续30 天,测空腹血糖值(禁食同实验前),比较各组动物血糖值及血糖降低得绝对值(即实验前后血糖得差值)。1、4、1、2 正常动物选健康成年动物按禁食 35 小时得血糖水平分组,随机选 1 个对比组与 1 个受试样品组(高剂量)。余操作同 1、4、1、1、3。1、4、2 糖耐量实验高血糖模型动物禁食 35 小时,剂量组给予不同浓度受试样品,模型对比组给予同体积溶剂,1520 分钟后经口给予葡萄糖 2、0g/kg 或医用淀粉 352、0g/kg,测定给葡萄糖后0、0、5、2 小时得血糖值或人医用淀粉后 0、1、2 小时得血糖值,观察模型对比组与受试样品组给葡萄糖或医用淀粉后各时间点血糖曲线下面积得变化。血糖曲线下面积=1/2×(0 小时血糖值+0、5 小时血糖值)×0、5+1/2×(2 小时血糖值+0、5 小时血糖值)×1、5=0、25×(0 小时血糖值+4×0、5 小时血糖值+3×2 小时血糖值)、1、5 数据处理及结果判定一般采纳方差分析,但需按方差分析得程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算 F 值,F 值 降空腹血糖实验:受试样品剂量组与对比...
