盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐得含量1 亚硝酸盐得测定(盐酸萘乙二胺法)1、1 原理 样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸(H2N—C6H4-SO3H)重氮化,产生重氮盐,此重氮盐再与偶合试剂(盐酸萘乙二胺)偶合形成紫红色染料,其最大吸收波长为 550nm,测定其吸光度后,可与标准比较定量。2HCl.H2NH2CH2CHN-+---N-Cl N--SO3H偶合-CHN2CH2NH2H.2HCl-N--H3SO--N+ HCl盐酸萘乙二胺紫红色1、2 仪器与试剂1、2、1 仪器 ① 小型粉碎机。 ② 分光光度计。 ③25ml 具塞比色管。1、2、2 试剂 ① 氯化铵缓冲溶液:在 1 000ml 容量瓶中加人 500ml 水,然后准确加入20、0ml 盐酸,振荡混匀后,再准确加入 50ml 氢氧化铵,用水稀释至刻度。必要时用稀盐酸与稀氢氧化铵调试 pH 至 9、6～9、7。 ② 硫酸锌溶液(0、42mol/L):称取 120g 硫酸锌(ZnSO4·7H2O),用水溶解,并稀释至 1000ml。 ③ 氢 氧 化 钠 溶 液 (20g/L): 称 取 20g 氢 氧 化 钠 用 水 溶 解 , 稀 释 至 1 000ml。 ④ 对氨基苯磺酸溶液:称取 10g 对氨基苯磺酸,溶于 700ml 水与 300ml 冰乙酸中,置棕色瓶中混匀,室温保存。 ⑤ 盐酸萘乙二胺溶液(1g/L):称职 0、1g 盐酸萘乙二胺,加 60%乙酸溶解并稀释至 100ml,混匀后,置棕色瓶中,在冰箱中保存,1 周内稳定。 ⑥ 显色剂:临用前,将盐酸萘乙二胺溶液(1g/L)与对氨基苯磺酸溶液等体积混合。仅供 1 次使用。 ⑦ 亚硝酸钠标准储备液:准确称取 250、0mg 于硅胶干燥器中干燥 24h 得亚硝酸钠,用水溶解后移入 500ml 容量瓶中,加 100ml 氯化铵缓冲溶液,用水稀释至刻度,混匀,在 4℃避光保存。此溶液每毫升相当于 500μg 得亚硝酸钠。 ⑧ 亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准储备液 1、00ml,置于 100ml 容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。此溶液每毫升相当于 5、0μg 得亚硝酸钠。1、3 操作步骤1、3、1 样品得处理 称取约 10、00g(粮食称取 5、00g)经绞碎混匀得样品,置于 250ml 烧杯中,加。70ml 水与 12ml 氢氧化钠溶液(20g/L),混匀,用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品 pH至 8,定量转移至 200ml 容量瓶中,加 l0ml 硫酸锌溶液,混匀。如不产生白色沉淀,可再补加 2～5ml 氢氧化钠溶液,搅拌混匀。置 60℃水浴中加热 10min,取出后冷至室温,加水至刻度,混匀。放置 0、5h,用滤纸过滤,弃去初滤液 20ml,收集滤液备用。1、3、2 亚硝酸盐标准曲线...
