2．质粒 DNA 和病毒（噬菌体）DNA 作为载体的主要特征是什么 为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的复制能力或整合能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力；具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点，具有合适的选择标记3．如何理解质粒的不相容性及其在 DNA 重组克隆过程中的运用意义 质粒的不相容性：具有相同或相似复制子结构及调控模式的两种不同的质粒不能稳定存在于同一受体细胞内.4．列举表达质粒、穿梭质粒、探针质粒和 cos 质粒的不同用途表达质粒:在多克隆位点的上下游分别装有两套转录效率较高的启动子、合适的核糖体结合位点序列（SD）序列以及强有力的终止子结构，使得克隆在合适位点上的任何外源基因均能在受体细胞中高效表达。穿梭质粒：质粒分子上含有两个亲缘关系不同的复制子以及相应的选择性标记，能在两种不同的受体细胞中复制并检测。探针质粒：用来筛选克隆基因的表达调控元件。通常含有报告基因，但缺少相应的调控序列（如启动子或终止子），只有含有启动子或终止子的调控序列被克隆进入载体后，报告基因才能别表达，表达量的大小直接反应了克隆进入的调控元件的强弱。cos 质粒：人工构建的含有 λDNA 的 cos 位点序列和质粒复制子的特别类型的质粒载体。具有大的装载量 ，可以用于构建基因组文库。5． II 类限制性核酸内切酶的主要酶学特征是什么分子量较小的单体蛋白，双链识别和切割活性仅需 Mg2+，识别位点为 4-6 个 bp 的回文序列，切割位点在识别序列中或靠近识别序列7． KLenow 酶与大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 在结构和功能上的主要区别DNA 聚合酶 I 包括大片段(klenow 片段)和小片段功能上：DNA 聚合酶 I 比 klenow 酶多了 5’→3’核酸外切酶活性，两者都具有 5’→3’DNA 聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性。8．影响限制性核酸内切酶活性的主要因素有哪些？ 温度、盐度等物理因素，DNA 样品纯度，DNA 甲基化程度，限制性核酸内切酶的缓冲液性质，甘油和微量的金属离子会抑制限制性内切酶的活性9.如何理解粘性末端比平头末端更容易连接在退火条件下，粘性末端的连接为分子内反应，平头末端是分子间反应，平头末端的连接反应更加复杂，速度也慢。因为一个平头末端的 5’磷酸基团或 3’羟基与另一个平头末端的 3’羟基或 5’磷酸基团同时相遇的机会显著减少，通常平头末端的连接速度比粘性末端慢 10-100 倍。11．为什么外源...
