PDCD4 介导病理性震荡剪切力对血管内皮细胞自噬和炎性小体的作用讨论背景动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是心脑血管系统中最常见的疾病之一,其发病机制一直是讨论的热点,陆续出现许多相关学说。近年来,临床讨论提示动脉粥样硬化的多发区域存在共同的血流动力学特点,即血流剪切力改变。正常的生理层流剪切力对血管内皮细胞具有保护作用,促进扩血管活性物质的分泌,抑制动脉粥样硬化斑块的发生、进展;异常的病理剪切力增强血管内皮细胞的氧化应激和炎症反应,并促进缩血管活性物质和炎性介质的分泌,促进动脉粥样硬化斑块的发生、进展。20 世纪 90 年代,一种新的凋亡相关基因,即程序性细胞死亡因子 4(Programmed Cell Death 4,PDCD4)由 Shibahara 等发现。随着讨论的深化,发现 PDCD4 具有调节多种肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移的作用,并参加多种免疫性、代谢性和炎症性疾病的过程。既往讨论发现 PDCD4 与心血管疾病关系密切,促进血管平滑肌细胞凋亡,抑制血管外膜成纤维细胞增殖,增加动脉粥样斑块不稳定性,加速动脉粥样硬化的发生和进展,但具体机制尚不清楚。自噬是一种古老的生物学现象,广泛存在于真核细胞中,也是一种新的程序性细胞死亡形式,通过降解细胞内的代谢废物并更新细胞器,来维持内环境平衡。讨论发现自噬与心血管系统关系密切,自噬流的减弱与细胞衰老所致的心肌肥大、心功能降低有关。心肌细胞缺血诱导自噬增强,而增强细胞自噬则能够有效减轻再灌注所致损伤。细胞自噬和血流剪切应力,两者之间存在相互作用,直接或间接影响动脉粥样硬化发生和进展。但是,病理性震荡剪切力如何调节血管内皮细胞自噬,PDCD4 是否参加这个过程尚不清楚。炎症反应参加动脉粥样硬化的发生进展多个过程。讨论发现活化的 NLRP3 炎性小体能够显著增加巨噬细胞向泡沫细胞转化,最终导致动脉粥样硬化。病理性震荡剪切力是否影响血管内皮细胞炎性小体的表达,PDCD4 是否参加该过程?这些问题尚需明了。目的 1.观察病理性震荡剪切力对血管内皮细胞自噬和炎症小体的影响。2.观察 PDCD4 是否介导病理性震荡剪切力对血管内皮细胞自噬和炎症小体的作用。方法 1.人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外提取和培育确保无菌条件,猎取状态良好的长约 15-30cm 的新生儿脐带,使用己预热无菌生理盐水冲洗管腔,后注入己预热的胰酶消化液在室温下消化,吸出胰酶消化液并使用 1X PBS 溶液,反复冲洗。离心后,弃上清液,加入培育液,混匀细胞,将悬浮液移至无菌培育瓶中,置于培育箱...
