细菌生长曲线测定生 72 伍国羽 2025012357组别 周四班 2-1-1实验同组人：王甦，李思妤，杨洋，翁琳倩，李焕规，陈光玉实验时间 2025 年 5 月 16 日实验目的1)了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；2)学习液体培育基的配制以及接种方法；3)反复练习无菌操作技术；4)了解不同细菌，不同接种方法在同一培育基上生长速度的不同；5)掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法实验原理将一定量的菌种接种在液体培育基内，在一定的条件下培育，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培育时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。单细胞微生物发酵具有 4 个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培育条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。将所测得的光密度值（OD600）与对应的培育时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。注意，由于光密度表示的是培育液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。实验仪器,材料和用具实验材料:大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；培育基(100mL/250mL 三角瓶 X10 瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培育基, 配方（for 1000mL）:牛肉粉 3+蛋白胨 10+NaCl 5+葡萄糖 10(g/L), pH7.5实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培育箱, 摇床，722s 分光光度计；实验用具:无菌 1000ul 吸头 80 个;无菌 5000ul 吸头 2 个;比色皿 9 个+共用参比杯一个.实验步骤1） 准备菌种：将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培育基中，37℃振荡培育 18h，另外准备单菌落平板各 1 块；2） 接种，分成 3 小组做，实验结果共享：第（1）小组1.取 1.0ml 大肠杆菌菌液接种到 100ml 培育基, 37 ℃ 200rpm2.取 3.0ml 大肠杆菌菌液接种到 100ml 培育基，37 ℃ 200rpm3.取 5.0ml 大肠杆菌菌液接种到 100ml 培育基，37 ℃ 200rpm第（2）小组 4.取一个大肠杆菌菌落接种到 100ml 培育...
