7500 荧光定量 PCR 仪使用说明注意事项：实验过程必须戴洁净的一次性乳胶手套进行操作。PCR 反应所用的 96 孔板、8 联管或单管必须为 ABI7500 专用,凸盖 PCR 管禁止使用。使用 8 联管两侧需用空管支撑,使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。实验数据用光盘刻录，禁止 U 盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室 D 盘中有指定文件夹,中心外部人员数据存于 FUWU 文件夹下的子文件夹中。操作步骤 开机依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码“7500”. 放入反应板！待电脑启动稳定后，按压7500 仪器电源按扭，等待仪器启动（约 30 s）。当仪器只显示 Power 状态指示灯时，方可按压托盘以打开它。注：关闭仪器托盘时,应按一个角度推压托盘的右侧。按 压 此处（以下过程按字母顺序 a→q 进行操作） 创建反应板文件双击电脑桌面上 SDS 软件图标 打开 SDS 软件；在对话框中选择 Create New Document … ，或选择菜单栏 File 〉 New；a. 从 Assay 下拉列表中选择反应板类型c. 单击 Next反应板文件类型有以下几种：1. Relative Quantification (ddCt) Plate（相对定量）2. Absolute Quantification (Standard Curve)（绝对定量，标准曲线）3. Allelic Discrimination（等位基因鉴别）4. Plus/Minus（阳性/ 阴性实验）d. 选择要添加到反应板文件的探针（引物），单击 Add 添加选中探针e. 假如在列表中未列出所 需 探 针 ， 请 单 击New Detector 创 建 新探针f.单击 Nextb. 为反应板文件命名 为每个反应孔指定探针和任务 为反应孔设置样品名g. 选取探针相同的反应孔h. 点击反应孔对应的探针。i.单击 Task 栏的下边指定探针任务。j.选择 Use （使用）。k. 单击 Finish （完成）。ghijkl.选取反应孔，直接输入相应样品名（也可右键调 出 反 Well Inspector对 话 框 ， 在 Sample Name 中进行修改） 设定 PCR 循环参数、运行程序 结束实验1.实验结束后关闭软件.（确认反应板文件数据已保存）2.打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘。3.按下 7500 仪器电源开关关闭机器。4.关闭电脑及显示屏。5.登记仪器使用情况.m. 选择 Instrument 选项卡，默认条件下显示标准 PCR 条件，可跟据实验具体情况修改；n. 单击 Add Dissociation Stage 添加溶解曲线循环；o. 修改 PCR 反应体积；p. 将反应板文件保存至指定路径。q. 点击 Start 运行程序pmnoq请严格根据仪器使用说明进行操作，如有不明之处或遇其他情况请及时联系仪器负责人.谢谢配合！！
