联系个人所学专业,选取某种或某类疾病,设计相关实验的动物模型,详细描述其方法及步骤,并阐述所选动物种类和级别的理由以及该动物日常生活和实验的环境要求(包括进出该环境的顺序),实验过程中的注意事项MicroRNA-378(miR-378)在心肌肥厚中的讨论一、实验原理: microRNA(miRNA)是一类小分子非编码单链 RNA,长约 22 个碱基,能通过与靶 mRNA3’非翻译区(3’UTR)互补配对,使其翻译受到抑制,从而在转录后水平对生物体内基因时序性表达起到精细调节作用。miRNA 的表达变化与心肌肥厚的发生、进展密切相关。本实验通过异丙肾上腺素和去甲肾上腺素诱导实验动物心肌肥厚,然后用 PCR 技术测定心肌细胞中 miRNA 的变化.二、实验目的: 通过统计学方法观察 miRNA 在正常心肌细胞和心肌肥厚的心肌细胞中的差异,从而将 miRNA 作为诊断心肌肥厚的潜在的生物学标志。三、实验材料及步骤:Wistar 雄性大鼠 30 只(200~250g/只,SPF 级别),异丙肾上腺素(ISO),去甲肾上腺素(NE),生理盐水。3.1 分组及造模 3。1.1 采纳随机数表的方法讲 30 只 wistar 大鼠随机分成三组,每组 10 只,分别为对比组、ISO 处理组、NE 组。3。1.21ISO 处理组:10 只大鼠连续 7 天背部皮下注射 ISO( 4 mg/kg/天),制成心肌肥厚模型。1NE 处理组:10 只大鼠连续 7 天背部皮下注射 NE( 4 mg/kg/天),制成心肌肥厚模型。1对比组:10 只大鼠同法背部皮下注射生理盐水(4 mg/kg/天),制成心肌肥厚模型。3。2 检测造模是否成功3。2。1 高频超声检测 分别于造模后第 2 周,称取大鼠质量,10%水合氯醛麻醉大鼠后,仰卧固定,将其胸前部剃毛,应用 TOSHIBA-6000 超声诊断仪,频率为 7.5 MHz 的探头置于其胸左侧,取径(LVEDD,LVESD)。左室射血分数(EF,%)、左室短轴缩短率(FS,%)、计算左室左室长轴切面,图像深度调至 3。0 cm,由二维超声引导,将 M 型超声取样线置于二尖瓣腱索水平,垂直于室间隔及左室后壁,经 M 型超声曲线进行测量,每一超声测定值取 3 个连续心动周期测量均值。超声测量指标:舒张末期及收缩末期室间隔厚度(IVSTd,IVSVTs)、舒张末期及收缩末期左室后 壁 厚 度 ( LVPWTd , LVPWTs) 、 舒 张 末 期 及 收 缩 末 期 左 室 内 质 量(LVM,mg)。3.2。2 大鼠心肌质量指数的测定 称取大鼠体质量(body weight, BW),摘眼球取血备用,脱颈椎处死,快速打开胸腔取心脏,去除心...