第 3 章 酶的制备酶的制备主要有两种方法,即直接提取法和微生物发酵生产法。早期酶制剂是以动植物作为原料,从中直接提取的。由于动植物生长周期长,又受地理、气候和季节等因素的影响,因此原料的来源受到限制,不适于大规模的工业生产。目前,人们正越来越多地转向以微生物作为酶制备的主要来源。—、酶的微生物发酵生产法1、微生物发酵生产法的优点酶的品种齐全 微生物种类繁多,目前已鉴定的微生物约有 20 万种,几乎自然界中存在的所有的酶,我们都可以在微生物中找到。酶的产量高 微生物生长繁殖快,生活周期短,因而酶的产量高。许多细菌在合适条件下 20 min 左右就可繁殖一代,为大量制备酶制剂提供了极大的便利。生产成本低 培养微生物的原料,大部分比较廉价,与从动、植物体内制备酶相比要经济得多。便于提高酶制品获得率 由于微生物具有较强的适应性和应变能力,可以通过适应、诱变等方法培育出高产量的菌种。另外,结合基因工程、细胞融合等现代化的生物技术手段,可以完全按照人类的需要使微生物产生出目的酶。正是由于微生物发酵生产具有这些独特的优点,因此目前工业上得到的酶,绝大多数来自于微生物,如淀粉酶类的 α 一淀粉酶、β 一淀粉酶、葡萄糖淀粉酶以及异淀粉酶等都是从微生物中生产的。2、微生物发酵生产法中尚待解决的问题尽管微生物发酵法生产酶制剂存在上述优点,但仍存在一些问题需要解决。消除毒性 微生物发酵法生产的酶制品中会带人一些细菌自身的生理活性物质,这些生理活性物质往往对人体有害,因此进行毒性实验是必需的。优良产酶菌种的筛选、培育 目前,大多数工业微生物制酶生产采用的菌种较少,仅局限于 11 种真菌、8 种细菌和 4 种酵母菌。只有不断寻找更多的适用的产酶菌种,才可能使越来越多的酶采用微生物发酵法进行工业化生产。3、微生物发酵生产法的条件控制微生物酶的发酵生产是在人为控制的条件下有目的迸行的,因此条件控制是决定酶制剂质量好坏的关键因素。条件控制包括以下几个方面。优良菌种的筛选 酶产量高低的关键在于得到产酶性能优良的菌种,这也是发酵生产法的首要环节。菌种必须具有繁殖快、培养基成分经济、产酶性能稳定、酶粗品易于分离纯化等特性。培养基 培养基是提供微生物生长、繁殖和代谢以及合成酶所需要的营养物质。由于大多数酶是蛋白质,酶的合成也是蛋白质合成的过程。因此,培养基的 pH、营养物质的成分和比例等条件必须有利于蛋白质的合成。碳源...