高中生物 第1章 微生物技术 第3课时 微生物数量的测定同步备课教学案 北师大版选修1-北师大版高二选修1生物教学案

第 3 课时 微生物数量的测定[学习导航] 1.阅读教材 P17内容，概述测定某种微生物数量的方法和步骤。2.结合教材 P15～17“测定土壤中微生物的数量”实验，掌握使用平板菌落计数法测定土壤中微生物的数量。[重难点击] 1.掌握测定某种微生物数量的方法和步骤。2.学会使用平板菌落计数法测定土壤中微生物的数量。一、微生物数量测定的方法和原理微生物数量的测定也是重要的微生物技术之一，平板菌落计数法是一种应用广泛的微生物数量测定方法。1.平板菌落计数法的原理：根据微生物在高度稀释的条件下，固体培养基上所形成的单个菌落，是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表一个单细胞。2.计算方法：从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是：同一稀释度的菌落平均数÷0.2÷稀释度×10。3.优缺点(1)优点：能测出样品的活菌数，可用于微生物的选种与育种、分离纯化及其他方面的测定。(2)缺点：操作烦琐、时间较长、测定值常受各种因素的影响。4.该方法统计的菌落数比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。1.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？答案 土壤中各种微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离。2.平板菌落计数法(1)平板菌落计数法根据操作步骤的不同可分为哪两种？答案 ①涂布平板法：用灭过菌的涂布器将一定量(一般为 0.1 mL)的适当稀释过的菌液涂布在琼脂培养基的表面，然后保温培养直到菌落的出现。记录菌落的数目并换算成每毫升样品中的活细胞的数量。② 倒平板法：将已知体积(0.1～1 mL)的适当稀释过的菌液加到灭过菌的培养皿内，然后倒入溶化后冷却至 45 ℃的琼脂培养基，水平晃动混匀，待凝固后保温培养到出现菌落，然后与涂布平板法同样计数。(2)平板菌落计数法中换算样品的含菌数依据什么数据换算？答案 依据稀释倍数、取样接种量和菌落数。(3)每隔多少小时统计一次菌落数目？应选取菌落数目何时(稳定时或不稳定时)的记录作为结果？答案 每隔 24 小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。(4)统计菌落时，要求细菌和放线菌每皿的菌落数目范围是多少？霉菌每皿的菌落数目范围是多少？答案 若测定细菌和放线菌，要求每皿以 30～300 个菌落为宜，若是霉菌则以每皿 10～100个菌落为宜。归纳总结 要使平板菌落计数法准确，需要掌握的关键步骤有：严格的无菌操作，否则容易被杂菌污染；...