专题 1 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序 [教学目标]1、简述基因工程原理及基本操作程序
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程
[教学重点和难点]1、教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤
2、教学难点(1)从基因文库中获取目的基因
(2)利用 PCR 技术扩增目的基因
[教学过程]一、目的基因的获取:1.目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的
2.获取目的基因的方法 (1)从基因文库中获取目的基因① 基因文库:将含有某种生物不同基因的许多 ,导人受体菌的群体中 ,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库
基因组文库:含有一种生物的 基因② 种类cDNA 文库:含有一种生物的 基因③ 目的基因的获取根据基因的有关信息:基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物 mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因
(2)利用 PCR 技术扩增目的基因
①PCR:是一项在生物体外 特定 DNA 片段的核酸合成技术
② 条件:已知目的基因的 序列
③ 过程:目的基因 DNA 受热形成 ,与 结合,然后在 ______ 的作用下进行延伸形成 DNA
④ 方式:指数扩增=2n(n 为扩增循环的次数)(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成
例 1 下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( ) ① 从基因文库中获取目的基因 ②利用 PCR 技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过 DNA 合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.②③二、基因表达载体的构建1.表达载体的组成:目的基因+ + +标记基因等
2.启动子:位于基因的 ,它是 结合的部位,驱动基因转录产生 mRNA
3.终止子:位于基因的 ,终止
4.表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且 给下一代;使目的基因 ____ 和发挥作用
5.标记基因: