第1页共9页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第1页共9页TSA联合基因工程腺病毒H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤的研究冯婷1刘霞1董子明#1#通讯作者：男54岁教授博士研究生导师研究方向：病理与病理生理学Email：dongziming@zzu.edu.cn（1郑州大学基础医学院病理生理教研室河南郑州450052）摘要目的：研究TSA药物对基因工程腺病毒H101杀伤食管癌EC9706细胞作用的影响，探讨HDAC抑制剂在腺病毒载体基因治疗中应用的可能性和作用机制。方法：①先成瘤后治疗组，构建裸鼠食管癌移植瘤模型，待肿瘤长出1W后，分组：TSA治疗组（瘤内注射1.0µmol/LTSA/只/次），H101治疗组（瘤内注射50×108vp/d），TSA联合H101治疗组即先注射TSA，第二天注射H101，注射剂量同上。另设空白对照组，以上治疗持续两周，治疗结束取瘤组织检测。②先处理后成瘤组分别采用浓度为4.0μmol/LTSA体外处理EC906细胞48h，浓度200×108vp/dH101处理EC9706细胞48h，及二者联合处理EC9706细胞48h，同样设置空白对照组，将处理后的细胞种植于裸鼠皮下构建裸鼠食管癌移植瘤模型。待瘤体长出2周后，取瘤组织用RealTimePCR、Western-bioting和免疫组化法检测CAR在移植瘤中的表达，测量肿瘤体积。结果：无论是先处理后成瘤组还是先成瘤后治疗组，TSA组和TSA联合H101治疗组均可上调裸鼠食管癌移植瘤组织中CAR蛋白的表达，相比与对照组和H101治疗组均有明显差异(P<0.05)，但TSA组和TSA联合H101治疗组之间相比差异无显著性(P>0.05)。而对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤大小影响TSA联合H101治疗组与TSA组、H101单独治疗组相比均有明显差异(P<0.05),TSA和H101组相比差异无显著性(P>0.05)。各治疗组与空白对照组相比，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：TSA能增强H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤，其作用机制是TSA上调了食管癌CAR蛋白的表达。关键词：柯萨奇-腺病毒受体（Coxsackieandadenovirusreceptor，CAR)；TrichostatinA（TSA)；基因工程腺病毒；EC9706；裸鼠[中图分类号]：R735.1；R730.231[文献标识码]：ATSAcombinedgeneticallyengineeredadenovirusH101fortreatmentoftumortissueofnudemicetransplantedwithhumanesophagealcancercellsfengting1liuxia1dongziming1#DepartmentofPathophysiology,CollegeofBasicMedicalSciences,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China[ABSTRACT]Objective：thestudyistoobserveTSAdrugfortheeffectofgeneticengineeringadenovirusH101killingesophagealcancerEC9706cell,anddiscusstheactionmechanismsandthepossibleapplicationsofHDACinhibitorinadenovirusvectorsforgenetherapy.Methods:thefirstexaminationistreatmentaftergrowingtumour.theexaminationfollowingisbuildingnudemodelof①transplantedtumorinesophagealcancer,andgroupingwhenthetumorgrowingoneweek.TSAtreatmentgroup(injectionTSA1.0μmol/LTSA/only/time);H101treatmentgroup(injectionH10150×108vp/d);TSAandH101treatmentgroup,thefisttoinjectTSA,andthenextdaytoinjectH101,theinjectiondosageasabove.anothergroupismatchedgroup.Obtainingtumortissueaftertreatingtwoweeks.thesectionexaminationistreatmentbeforegrowingtumour.onegroupis②utilizingtheconcentrationof4.0μmol/LTSAtotreatEC906cells48h,tnesecondgroupisutilizingtheconcentrationof200×108vp/dH101totreatEC9706cells,48h,tnethirdgroupisthetwodrugsinjoinedtotreatEC9706cells48h,anothergroupismatchedgroup.thetreatedcellsgrownundernskinofnudemicetobuiltxenograftmodelofesophagealcancer.Aftertwoweeks,obtainingthetumortissuesandusingRealTimePCR,Western-biotingandimmunohistochemistrytodetectexpressionofCARinthetumorandmeasuretumorvolume.Results:.Whetherthefirstexaminationoftumororthesectionexamination,compareingthematchedgroupandonlyH101treatmentgroup,TSAtreatmentgroupandTSAassociatingwithH101treatmentgroupabletorisetheexpressionofCAR第2页共9页第1...
