微生物菌种资源纯度检测技术规程VIP免费

微生物菌种资源纯度检测技术规程目次前言………………………………………………………………………………………2引言………………………………………………………………………………………31范围…………………………………………………………………………………………42术语、定义、缩略语和符号……………………………………………………………43菌种的纯度检测……………………………………………………………………………4参考文献………………………………………………………………………………………8前言本规范由科学技术部农村与社会发展司提出。本规范起草单位：中国农业科学院土壤肥料研究所、中国科学院微生物研究所、中国林业科学研究院森林保护研究所、中国药品生物制品检定所、中国医学科学院医药生物技术研究所、中国兽医药品监察所、中国食品发酵工业研究院。本规范主要起草人：张晓霞、姜瑞波、顾金刚、康孟佼、李世贵、张瑞颖、阮志勇、周宇光、朴春根、叶强、张月琴、陈敏、程池等。引言微生物菌种资源种类繁多，需要针对不同的微生物类群建立简便有效的形态学、生物化学等标准化的纯度检测技术。微生物菌种纯度检测是微生物菌种进行鉴定、保存、评价和利用的前提条件，是确保鉴定结果的准确性和资源保藏质量的基本保障。制定本规程的目的是为健全质量保证管理体系，保证微生物菌种资源的质量，规范各类微生物菌种资源纯度检测。微生物菌种纯度检测技术规程1范围本规程规定了古菌、细菌、真菌、病毒（种）纯度检测的程序和方法。本规程适用于从事微生物菌种资源保藏及研究的机构、大学、企业、个人等。2术语、定义下列术语和定义适用于本规程2.1纯度检测puritycheck指通过适当的方法检测菌种是否为纯培养物。2.2纯培养pureculture由单个细胞的后代组成的培养物，即单细胞培养物或无性繁殖系。通常是由挑取单个菌落或利用单胞分离技术，移种繁殖获得。3菌种的纯度检测3.1古菌和细菌的纯度检测3.1.1菌落形态在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线，适宜培养后，同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似；对于两种或以上形态的出发菌株应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养，检测是否重复出现相同特征。3.1.2细胞形态对数生长期的培养物革兰氏染色反应应呈现一致性；细胞形状、大小、荚膜等特征应相似3.1.3芽孢大小、位置、形状宜检测样品是否形成芽孢，对形成芽孢的菌种，其芽孢大小、位置、形状应相似。3.2放线菌菌种纯度检测3.2.1菌落形态在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线,挑取单菌落，适宜培养后，在同一平板上单菌落形状、大小、表面状况、质地、光泽、颜色等应相似。如怀疑为细菌污染，则30℃液体培养24小时，培养液不应浑浊，如浑浊则视为细菌污染。3.2.2培养特征分别接种三种以上培养基，在三种以上培养基上的培养特征应想同，包括气生菌丝、基内菌丝、可溶性色素的颜色等。3.2.3孢子丝及孢囊在特定的培养基、培养温度及培养时间等条件下，孢子着生方式、孢子丝形态及其颜色或孢囊着生位置（气丝或基丝）、孢囊的形状，大小应呈现出一致性。3.3酵母菌种纯度检测3.3.1菌落形态应对菌落形态相似性进行检测。在特定的培养基上，通过对待检测菌株进行稀释或划线涂布平板获取单菌落，一定的培养条件下，比较同一平板内，菌落的大小、形状、颜色隆起、表面状况、质地、光泽等应一致。3.3.2个体形态应对检测样品的个体形态进行检测。在指定的培养基及培养条件下，细胞形状、大小及细胞的增殖方式应一致。3.3.3繁殖方式酵母繁殖的方式应一致，如是芽殖，出芽的方位、数量应一致。3.4丝状真菌菌种纯度检测3.4.1菌落特征菌落的形态等表观特征应一致。3.4.2菌丝特征在特定的培养基和培养条件下，菌丝分隔、菌丝形态等应一致。3.4.3其他主要显微特征应一致3.4.4检测是否有细菌污染3.4.5对于外观上不能确定菌种纯度的，利用单胞分离技术获得纯培养物进行对比，其菌丝、孢子等特征应与原始菌株的描述一致。3.5病毒的纯度检测3.5.1纯粹检查应将待检病毒液直接接种含硫乙醇酸盐培养基（T.G）、酪蛋白胨琼脂培养基（...