第一部分微生物的利用实验2分离以尿素为氮源的微生物浙科版选修11.使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）。2.利用指示剂颜色的变化检知（脲酶）所催化的反应。1、尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶CO(NH2)脲酶+CO2NH3+H2O一、基础知识要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：⑴抑制大多数微生物生长；⑵造成有利于该菌生长的环境。结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。3、实验室中微生物的筛选原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。4、培养基选择分解尿素的微生物的原理本实验中，酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色范围是pH6.4～8.2，在中性情况下呈黄色，碱性情况下呈红色，尿素NH3中性碱性酚红颜色：黄色红色细菌１、制备无菌的尿素固体培养基和ＬＢ固体培养基尿素培养基葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g琼脂糖0.5g酚红0.25g水15mlLB培养基蛋白胨0.25g酵母粉0.12gNaCl0.25g琼脂糖0.5g水25ml对照组实验组二、操作过程灭菌后再加尿素２、倒平板：需要倒2个ＬＢ培养基，6个尿素固体培养基LB(对照)尿素10-410-5每个稀释度1个LB对照平板3个尿素平板(平行重复组)３、制备一定浓度梯度的细菌悬液：１g土壤＋９９ml无菌水，振荡，为１０２稀释液，依次制备１０３、１０４、１０５的土壤稀释液。４、稀释涂布分离法分离细菌取10-4和10-5各0.1ml菌悬液接种涂布分离涂布前后三角刮刀需要灼烧吗？５、培养观察（倒置，３７度）平板倒置按浓度捆成一摞恒温37℃培养LB培养基上10-2、10-3、10-4、10-5稀释度土样涂布结果尿素培养基上10-2、10-3、10-4、10-5稀释度土样涂布结果
