第一页,共四十七页。提问:植物细胞工程常用的技术手段有哪些?•植物组织培养,植物体细胞杂交这些技术的理论根底:植物细胞的全能性动物细胞全能性如何?动物细胞工程常用的技术有哪些?第二页,共四十七页。动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体制备细胞核移植动物细胞工程技术动物细胞工程的根底第三页,共四十七页。2.2.1动物细胞培养和核移植技术第四页,共四十七页。教学目标•简述动物细胞培养的过程、条件及应用。•简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。第五页,共四十七页。重点•动物细胞培养的过程及条件。•用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。难点•用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。重点难点第六页,共四十七页。烧伤病人图片异体皮肤移植图片第七页,共四十七页。皮肤烧伤,如果创面很小〔不大于硬币〕只要保持清洁,甚至深度烧伤,也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大,常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片,可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位〔自体植皮〕,也可取自其他活人或尸体〔异体植皮〕等。自体植皮是永久性的,取自其他人或动物的植皮是暂时性的,是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施,10~14天后就要被身体排斥。如果一个大面积烧伤的病人来说,自体皮肤有限,其他渠道的皮肤来源缺乏。如何才能获得大量的自体健康皮肤?第八页,共四十七页。人耳鼠“人耳鼠〞再出风头2001年,一只特别的活老鼠在北京引起轰动——这是有着一对红眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的小白鼠。值得一提的是,这只小白鼠的背上,竟长着一只几乎与身子一般大小的“人耳〞。这只老鼠背上的“人耳〞是由上海市第九人民医院副院长、整复外科主任曹谊林教授利用组织工程技术复制出来的。在京展出的数天,尽管门票高达20元,但还是有将近20万人,心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠〞的风采。人耳鼠的出现,透露了怎样的信息?第九页,共四十七页。1、概念是指从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。2、原理细胞分裂增殖一、动物细胞培养如何进行细胞培养?第十页,共四十七页。请同学阅读教材和图2-16来描述细胞培养的根本过程:第十一页,共四十七页。取动物动的组织块胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液细胞悬浮液接触抑制局部细胞“癌变〞,无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体10代细胞原代培养传代培养细胞贴壁胰蛋白酶处理、细胞株细胞细胞系2.动物细胞培养过程:培养瓶适宜条件培养分瓶培养第十二页,共四十七页。强调一:细胞贴壁过程■细胞贴壁:在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。■培养瓶或培养皿壁要求:外表光滑、无毒、易于贴附。第十三页,共四十七页。■当贴壁细胞分裂生长到外表相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。强调二:接触抑制第十四页,共四十七页。有关概念:1、原代培养:将动物组织消化后的初次培养。〔分瓶前〕2、传代培养:将贴满瓶壁的需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。这样的培养过程称为传代培养。〔分瓶后〕第十五页,共四十七页。在传代培养过程中10代以前的细胞核型不变10~50代,增殖逐渐减慢,以至于完全停止,局部细胞的细胞细胞核型可能发生改变50代以后的细胞发生突变,获得不死性,朝着等同于癌细胞的方向开展。应用:目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。第十六页,共四十七页。有关概念3、细胞株:10到40、50代的细胞,遗传物质没发生改变。4、细胞系:超过50代的细胞,遗传物质发生改变,可无限增殖。。细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。第十七页,共四十七页。细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系?多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变第十八页,共四十七页。思考题:1、选用健康动物体内什么样的组织块做细胞培...