超氧阴离子自由基定位荧光探针的合成及分析简介目的：设计合成用于定位检测线粒体内超氧阴离子自由基(O2-.)的新型双光子荧光探针。意义：1.优良的定位荧光探针可高灵敏度和高选择性的检测细胞内亚细胞区域的功能活性物种（自由基、金属离子）。2.双光子荧光探针克服了单光子荧光探针的光漂白与光致毒而更适于生物检测与成像,为生命科学研究提供了更为锐利的工具。探针的结构及反应产物结构图NHPPh3OSNHHNSNHPPh3OSNNSO2-.一、探针的合成步骤1.芴酰胺1的合成2.2,7-二溴甲基芴酰胺2的合成3.2,7-二醛基芴酰胺3的合成4.超氧阴离子自由基探针的合成二、探针的荧光性质三、结论论文的主要内容1.芴酰胺的合成OHONH2NHOEDC,HOBTDMF1Ph3PPPh32.2,7-二溴甲基芴酰胺2的合成NHO1PPh3HCHO,NaBrHAc,50%H2SO4NHPPh3OCH2BrBrH2C2一、探针的合成步骤3.2,7-二醛基芴酰胺3的合成NHPPh3OCHOOHCNaH/DMFMeMeO2NNHPPh3OCH2BrBrH2C234.超氧阴离子自由基探针的合成NHPPh3OCHOOHC3NH2SHbutanol/tolueneNHPPh3OSNHHNS4二、探针的荧光性质45050055060065005000100001500020000250003000035000400004500050000FluorescenceIntensitywavelength/nm1234图2探针及与超氧阴离子自由基反应后的荧光谱图。探针：20µM，O2-.：6µM，20mMpH7.40PBS缓冲溶液三、结论利用双光子荧光团9-氨基芴合成了一种检测线粒体内O2-.的新型双光子荧光探针，荧光光谱实验表明探针可以对O2-.很好的响应。可以将该双光子荧光探针应用到细胞，组织和活体成像中。谢谢！
