第五章 薄层色谱 .pptxVIP免费

第五章薄层色谱法纸层析和薄层层析也属于色谱分析法。但与其它色谱方法不同的是在分离过程中一般不使用动力源,流动相的移动是依靠毛细作用。将试样点在色谱滤纸或层析板的一端，并将该端浸在作为流动相的溶剂（常称之为展开剂）中，随着溶剂向上的移动，经过试样点时，带动试样向上运动。第一节薄层色谱法的基本原理一、基本原理（一）吸附色谱分离原理利用吸附剂对不同组分吸附力的大小及展开剂解吸附作用的差异进行分离。吸附牢的组分随展开剂的移动慢，吸附弱的组分随展开剂移动快，一段时间后，组分被分离。固定相：固体吸附剂流动相：液体展开剂（二）比移值和相对比移值（1）比移值Rf是薄层色谱的定性参数，一定条件下Rf为定值，在0—1之间，可用范围在0.2-0.8之间。组分的极性越大，Rf越小，反之越大。（2）相对比移值RsRf小于1，而Rs不一定小于1二、吸附薄层色谱中吸附剂与展开剂（一）吸附剂（固定相）的选择常用的吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸附树脂。吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不起反应。（1）硅胶：极性吸附剂，应用范围广物理吸附为主，氢键吸附为辅微酸性，不直接用于碱性成分的分离机械强度好，适用于薄层色谱吸附容量大，与羟基数目有关常用硅胶的规格：硅胶H，硅胶G，硅胶GF254等（2）氧化铝：a极性吸附剂，较硅胶强。b物理吸附为主，氢键吸附为辅。C.微碱性，不直接用于酸类物质的分离。碱性氧化铝：适用于碳氢化合物、生物碱及其它碱性化合物的分离。中性氧化铝：应用最广，适用于醛、酮、醌及酯类的分离酸性氧化铝：适用于有机酸的分离。硅胶和氧化铝含水量越高，吸附活性越弱。只要在110℃左右加热，这些“自由水”就能被可逆性地除去。利用这一原理可以对吸附剂进行活化（去水）和脱活化（加水）处理，以控制吸附剂的活性。硅胶、氧化铝的含水量与活性级别活性等级IIIIIIIVV氧化铝加水量/%0361015硅胶加水量/%05152538硅胶、氧化铝薄层：被分离物质的极性越大，越易被吸附。一般规律：（1）官能团极性越大，整个分子的极性越大，越易被吸附；（2）形成分子内氢键是，被吸附力减弱；（3）同系物中，分子量越大，极性越小，被吸附力越弱。（二）展开剂（流动相）的选择硅胶、氧化铝薄层：展开剂的极性越大，其展开能力越强，化合物在色谱中移动的速度就越快，表现为Rf增大。常用溶剂极性大小石油醚＜环已烷＜四氯化碳＜苯＜甲苯＜乙醚＜三氯甲烷（氯仿）＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水选择原则：被分离成分极性大展开剂极性大被分离成分极性小展开剂极性小被分离组分极性展开剂极性吸附剂活性Rf洗脱顺序大大弱小后洗脱小小强大先洗脱硅胶薄层色谱规律总结第二节薄层色谱系统简介第三节操作方法及注意事项略：在操作方法中部分介绍1、薄层板的制备2、点样3、展开4、显色和定位5、薄层扫描仪对斑点扫描1、薄层板的制备载板要求：具有一定的机械强度、化学惰性，耐一定温度、表面平整、价格便宜薄层板分类和制法软板的制备硬板的制备倾注法平铺法机械涂布法（1）软板的制备软板：直接将吸附剂铺在玻璃板上制成，不加粘合剂3.橡皮膏4.橡皮管要求：厚度→随分离要求而定，一般0.25～0.5mm玻璃棒推动速度不宜过快、也不应停顿→影响厚度均一性优点：方法简便、随用随铺、展开速度快。缺点：吸附剂易脱落、只能用近水平展开，效果差。（2）硬板的制备硬板：吸附剂加粘合剂制成的板常用的粘合剂：无机粘结剂：煅石膏（Ｇ）机械强度差，易脱落，但不易腐蚀硅胶G--，含13-15%煅石膏制备硅胶G--，含30%煅石膏氧化铝G—含9%煅石膏粘结剂作用：加强固定相颗粒的附着力，增加薄层板润湿性，改善色谱分离。有机粘结剂：羧甲基纤维素钠（CMC-Na）机械强度好，不易脱落，但易腐蚀，不适于浓硫酸显色a、倾注法：硅胶G或氧化铝G，直接加水调成糊状硅胶或氧化铝，加羧甲基纤维素钠水溶液调成糊状倒在玻璃板上均匀铺开、振荡、晾干、活化、置干燥器中备用。b、平铺法：1.吸附剂薄层2.涂布器3.玻璃夹板4.玻璃板5.玻璃夹板过程：制板→振荡→晾干→活化→备用优点：一次铺多块薄层板，简单易行。c、机械涂布法：优...