DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.140546超高效液相色谱/串联质谱法同时测定水、土壤及粪便中25种抗生素郭欣妍摇王娜*1摇郝利君2摇智勇3摇许静1摇王昝畅1摇单正军11(环境保护部南京环境科学研究所,南京210042)2(中国药科大学理学院分析化学教研室,南京211198)摇摇3(南京信息工程大学,南京210044)摘摇要摇本研究通过超声提取鄄固相萃取,建立了利用超高效液相色谱/串联质谱同时分析粪便、土壤和水体中25种兽药抗生素的方法,考察了串联SAX小柱对土壤样品和粪便样品的净化效果,以及正己烷提取对粪便样品提取液脱脂的净化效果。实验结果表明:本方法对25种兽药抗生素加标回收率为50.0%~121.9%,相对标准偏差为1.1%~14.7%(n=9);土壤和粪便的方法检出限为0.0002~0.0560滋g/kg,水体的方法检出限为0.002~0.28ng/L;串联SAX强阴离子交换柱后,土壤样品的基质效应降低为75%~160%之间,粪便样品降低为55%~120%之间;粪便样品经正己烷脱脂后,基质效降为55%~120%之间。已将本方法应用于养殖场周边环境介质的检测。关键词摇抗生素;喹诺酮类;磺胺类;四环素类;大环内酯类;液相色谱鄄串联质谱摇2014鄄06鄄27收稿;2014鄄09鄄16接受本文系环保公益性行业科研专项(Nos.201109038,201309031)资助项目*E鄄mail:wangna@nies.org1摇引摇言兽药抗生素除了被广泛用于预防和治疗动物疾病[1],还有一大部分在畜禽养殖业中以亚治疗剂量添加于动物饲料中[2,3],起到刺激动物生长和促进增产的作用。兽药抗生素在动物体内不能完全代谢降解,随畜禽粪便和尿液排出的比例很高[4],这些含兽药抗生素的畜禽粪便可通过有机肥料的施用进入农田土壤,并有可能通过渗透、径流、淋溶等方式迁移到地表水和地下水中,而水体中的兽药抗生素也有可能被沉积物吸附[5,6]。已有不少文献报道了粪便、土壤、水体和沉积物等环境介质中检测到高浓度的兽药抗生素[7,8]。近年来,国内外对抗生素的研究日趋重视,关于环境中抗生素残留检测的研究很多[7,8]。但由于环境介质成分的复杂性会对抗生素的分析带来不可预知的干扰,严重影响分析方法的准确性,开发一种能有效降低复杂环境介质的基质效应干扰,并且同时检测不同环境介质中多类抗生素残留的分析方法尤为重要。马丽丽等[9]报道了一种土壤中同时检测磺胺类、四环素类、氟喹诺酮类18种抗生素的方法,葛峰等[10]报道了固相萃取鄄超高效液相色谱鄄串联质谱法同时测定有机肥中四大类18种抗生素残留的方法,但上述方法均忽略了复杂基质对检测的影响,缺少对复杂基质的净化研究。本研究通过超声提取鄄固相萃取,建立了25种目标抗生素的高灵敏检测方法,实现了对25种抗生素在土壤、粪便和水体介质中残留的同时分析,并且验证了SAX小柱对粪便(土壤)样品提取液的净化效果和正己烷对粪便样品提取液脱脂的净化效果,提供了能降低粪便(土壤)样品基质效应行之有效的方法。2摇实验部分2.1摇仪器与试剂ACQUITYTM超高效液相色谱仪鄄QuattroPremierXE质谱仪,配MassLynxV.4.1软件WatersAcqu鄄ity;UPLCBEHC18色谱柱(100mm伊2.1mm,1.7滋m)。以上仪器购自美国Waters公司。真空冷冻干燥机(美国Virtis公司);高速冷冻离心机(德国Sigma公司);Milli鄄Q超纯水器(美国Millipore公司);AG鄄285电子天平(瑞士Mettler公司);MG鄄2200氮吹仪(日本EYELA公司);12通道固相萃取装置(美第43卷2015年1月摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇分析化学(FENXIHUAXUE)摇研究报告ChineseJournalofAnalyticalChemistry摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇第1期13~20国Waters公司);WatersOasisHLB固相萃取柱(200mg,6mL,美国Waters公司);强阴离子SAX交换柱(200mg,6mL,安谱公司)。乙腈、甲醇,甲酸(色谱纯,德国Merck公司);实验用水为经Milli鄄Q净化系统(0.22滋m孔径过滤膜)过滤的去离子水;磷酸盐缓冲液(pH=3):将27.2gKH2PO4与1.35mLH3PO4用去离子水定容至1L。标准品:诺氟沙星(Norfloxacin,99.5%),环丙沙星(Ciprofloxacin,95.0%),恩诺沙星(Enrofloxacin,98.0%),氧氟沙星(Ofloxacin,99.0%),氟罗沙星(Fleroxacin,99.0%),沙拉沙星(Sarafloxacin,99.0%),磺胺嘧啶(Sulfadiazine,98.0%),磺胺甲嘧啶(Sulfamerazine,99.0%),磺胺二甲嘧啶(Sulfa鄄methazine,99.0%),磺胺间二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine,9...
