!"#$人脐静脉内皮细胞体外培养、鉴定与形态学特征观察!朱惠莲!夏敏!唐志红!马静!凌文华朱惠莲!夏敏!唐志红!马静!凌文华!中山大学公共卫生学院营养学系，广东省广州市"#$$%$朱惠莲!，女，#&’’年生，广东省南雄市人，汉族，中山大学在读博士，副教授，主要从事动脉粥样硬化发病机制及营养防治的研究。()*)+,(-./,0-102)3-24+电话：5%’67$6%899$’#8中图分类号：!"#$文献标识码：%文章编号：&’(&)"*+’,+--#.+()"/$#)-+收稿日期：+--#)-#)+&修回日期：+--#)-’)&#,-*012.!"#$"%&’()&*$(+(,-$(.*-*)/.%01.#.2(,.34&%5-$(.*.+&*6).$1&#(-#,&##4+%./1"/-*"*3(#(,-#5&(*!"#!$%&!"#$%#&’()"*+#’,#&*()#$!-’./&’.*0#’.+&*12’$!"&%#’.!"#$%#&’()"*+#’,#&*()#$!-’./&’.*0#’.+&*12’$!"&%#’.*:);<=>61)+>?@A->=B>B?+!C-D*B4E)<*>(F?**)/)?@G-+H<>60)+I+BJ)=0B>K!L-<+/,(?-"#$$%$!L-<+/3?+/C=?JB+4)!F(B+B?+<*B>K!N?=+B+#&’’B+A<+OB?+/FB>K!L-<+/3?+/C=?JB+4)!F(B+-3KB+/B+G-+H<>60)+I+BJ)=0B>K@?=3?4>?=6<>)!P00?4B<>);=?@)00?=2Q)0)<=4(3B=)4>B?+R;<>(?/)+)0B0<+3+->=B>B?-0;=)6J)+>B?+?@<>()=?04*)=?0B02()*)+,(-.0-102)3-24+S)*);(?+)R5%’67$6%899$’#8!"#"$%"&’+--#)-#)+&(##")*"&’+--#)-’)˞$%-,$!"#$S?)0>()1?3)*?@(-1<+J<04-*<=)+3?>()*B<*4)**0TUF0V>?;=?JB3)B1;?=><+>)O;)=B1)+><*1)>(?3@?=>();<>(?/)+)0B0=)0)<=4(?@<>()=?04*)=?0B0!"#!$%&2#%&’()*$UF0B+-1DB*B4<*J)B+W)=)3B/)0>)30);<=<>)3<+30-D4-*>-=)3WB>(#27"/XY>=K;0B+!T72"/XY>=K;0B+R$27/XYU:SPZ#R#[X[V2P+31?=;(?*?/B4?D0)=J<>B?+<+3)J<*-<>B?+?@UF0W)=)1<3)WB>(*B/(>1B64=?04?;K!)*)4>=?+1B4=?04?;K<+3B11-+?(B0>?4()1B0>=K2+%*,-&*RS();=B1<=K4-*>-=)3UF00><=>)3>?/=?W<>><4(B+/>?@*<0\7(?-=0<@>)=B+?4-*<>B+/2S()UF0<==4(B+/0>?+)-+3)=*B/(>1B4=?04?;K]!@<4>?=B+>()UF00(?W)3;?0B>BJ)=)<4>B?+DKB11-+?(B0>?64()1B0>=K]^6C4?=;-04*)0W<0B+>()4)**;*<01-+3)=)*)4>=?+61B4=?04?;K!W(B4(W)=)B3)+>B@B)3<0UF02.(/.-,*"(/$EB/(;-=B>KUF4<+D)(<=J)0>)3WB>(3B/)0>B?+?@;<+64=)<>B+;)=@-0B?+WB>((B/(0-=JBJ<*=<>)2S(B01)>(?3;=?JB3)0)O;)=B1)+><*1?3)*@?=J<04-*<=UF=)0)<=4(2!"#$%&’()*&+),-!$&*).&%(,-/$01#23#45&(65,3(7(8)3(9,),6:94;"929-(89<=>54?)3(9,975,693"52()28522>749:"#:),#,<(2(8)2?5(,!"#!$%&0’(&"))*&+!",(*-").-")/*@AABCDE@FGHIDJBKIE1"(,)G朱惠莲&夏敏&唐志红&马静&凌文华0人脐静脉内皮细胞体外培养、鉴定与形态学特征观察L.M0中国临床康复，@AAB，DE@FG：IDJBKI344560077789:;<=>8摘要目的：建立人血管内皮细胞的培养模型，为体外研究动脉硬化发病机制提供重要的实验手段。方法：采用#27"/XY胰蛋白酶（72"/XY胰蛋白酶：$27/XYU:SPZ#_#’(’）消化、分离和传代人脐静脉内皮细胞，并用光镜、电镜和免疫组化等方法进行内皮细胞的形态观察和鉴定。结果：原代培养的内皮细胞在接种后约7(开始贴壁生长，光镜下内皮细胞呈铺路石状镶嵌排列；免疫组化可见内皮细胞胞浆中人第[‘‘‘因子相关抗原呈阳性反应；电镜下可见胞浆中有^6C小体，证实培养的细胞为内皮细胞。结论：用胰酶灌注消化脐静脉可获得高纯度的内皮细胞，细胞存活率高。本方法为血管内皮细胞的研究提供了实验模型。主题词：内皮，血管；脐静脉；细胞，培养的；免疫组织化学；显微镜，检查，电子8引言血管内皮细胞为位于血管内壁与血液直接接触的单层细胞，其特殊的解剖学部位使内皮细胞能敏感地感知血流、压力、炎症信号以及血液循环中激素水平的变化，通过一系列信号转导过程与邻近及远处的细胞相互联系，对各种刺激做出反应，维持机体内环境稳定，在病理生理过程中起着重要作用。动脉粥样硬化（"#$%&’()*%&’(+(，,-）涉及多因素和复杂的分子机制，血管内皮细胞功能受损与机能障碍是,-发病的中心环节!"#，因此血管内皮细胞体外培养是近年来研究,-发病机制的一个重要的手段。新生儿脐带来源充足，取材、操作方便，因而成为血管内皮...
