电脑桌面
添加小米粒文库到电脑桌面
安装后可以在桌面快捷访问

改良Lowry氏法测定蛋白质含量VIP免费

改良Lowry氏法测定蛋白质含量_第1页
1/7
改良Lowry氏法测定蛋白质含量_第2页
2/7
改良Lowry氏法测定蛋白质含量_第3页
3/7
www.ggene.cnwww.ggene.cn基因时代,为生命科学提供源动力!基因时代,为生命科学提供源动力!改良改良LowryLowry氏法测定蛋白质含量氏法测定蛋白质含量TheLowryMethodforProteinQuantitationTheLowryMethodforProteinQuantitationwww.ggene.cnwww.ggene.cn基因时代,为生命科学提供源动力!基因时代,为生命科学提供源动力!目的与要求:目的与要求:掌握改良掌握改良LowryLowry氏法测定蛋白质含量的氏法测定蛋白质含量的原理及方法;原理及方法;了解标准曲线在物质定量测定中的应用了解标准曲线在物质定量测定中的应用及绘图要点。及绘图要点。www.ggene.cnwww.ggene.cn基因时代,为生命科学提供源动力!基因时代,为生命科学提供源动力!实验原理实验原理::在碱性条件下蛋白质的肽键与在碱性条件下蛋白质的肽键与CuCu2+2+螯合,形成蛋白质螯合,形成蛋白质--铜复合物。(双缩脲铜复合物。(双缩脲反应反应BiuretReactionBiuretReaction))蛋白质分子中带有酚基的酪氨酸极蛋白质分子中带有酚基的酪氨酸极易使酚试剂中的磷钼酸易使酚试剂中的磷钼酸--磷钨酸还原,生磷钨酸还原,生成钼蓝成钼蓝--钨蓝蓝色化合物,蓝色深浅与蛋钨蓝蓝色化合物,蓝色深浅与蛋白质含量成正比。利用蓝色深浅与蛋白质白质含量成正比。利用蓝色深浅与蛋白质浓度成正比的关系可绘制标准曲线,测定浓度成正比的关系可绘制标准曲线,测定样品中蛋白质含量。(还原反应)样品中蛋白质含量。(还原反应)www.ggene.cnwww.ggene.cn基因时代,为生命科学提供源动力!基因时代,为生命科学提供源动力!试剂试剂(mL)(mL)试管号试管号001122334455测定管测定管蛋白质标准溶液蛋白质标准溶液(0.20mg/ml)(0.20mg/ml)000.100.100.200.200.40.4000.600.600.80.80011生理盐水生理盐水1.01.0000.900.900.800.800.60.6000.400.400.20.20000试剂试剂AA0.90.9000.900.900.900.900.90.9000.900.900.90.9000.900.90操作步骤操作步骤www.ggene.cnwww.ggene.cn基因时代,为生命科学提供源动力!基因时代,为生命科学提供源动力!混匀后置于混匀后置于3737度水浴度水浴1010分钟。分钟。冷却后各管加入试剂冷却后各管加入试剂B0.1mLB0.1mL,室,室温放置温放置1010分钟。分钟。各管接着加入试剂各管接着加入试剂C3mLC3mL,立即混,立即混匀,置匀,置3737度水浴度水浴1010分钟。分钟。冷却后,以冷却后,以00号管为空白,在分光号管为空白,在分光光度计上以波长光度计上以波长650nm650nm比色读取光密度值。比色读取光密度值。www.ggene.cnwww.ggene.cn基因时代,为生命科学提供源动力!基因时代,为生命科学提供源动力!结果与计算结果与计算::根据测定管光密度值查标准曲线,根据测定管光密度值查标准曲线,由标准曲线计算血清蛋白质含量,再按血由标准曲线计算血清蛋白质含量,再按血清稀释倍数换算为清稀释倍数换算为g/Lg/L。。www.ggene.cnwww.ggene.cn基因时代,为生命科学提供源动力!基因时代,为生命科学提供源动力!注意事项注意事项::各管加酚试剂时必须快速,并立即各管加酚试剂时必须快速,并立即摇匀,不应出现混浊。摇匀,不应出现混浊。移液管使用前要看清楚刻度和是否移液管使用前要看清楚刻度和是否写着快、吹,如有则需要用洗耳球吹出剩写着快、吹,如有则需要用洗耳球吹出剩余液体。余液体。减量法可有效减少误差。减量法可有效减少误差。分光光度计使用前需预热,绝对调分光光度计使用前需预热,绝对调零和空白管调节透光度为零和空白管调节透光度为100%100%。。

1、当您付费下载文档后,您只拥有了使用权限,并不意味着购买了版权,文档只能用于自身使用,不得用于其他商业用途(如 [转卖]进行直接盈利或[编辑后售卖]进行间接盈利)。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。
3、如文档内容存在违规,或者侵犯商业秘密、侵犯著作权等,请点击“违规举报”。

碎片内容

改良Lowry氏法测定蛋白质含量

确认删除?
VIP
微信客服
  • 扫码咨询
会员Q群
  • 会员专属群点击这里加入QQ群
客服邮箱
回到顶部