一、常用有以下方法:1半固体保存法:将菌落穿刺接种在半固体中,4度存放,一般可以管3-6月2低温冻存法:接种菌落的肉汤加20%灭菌甘油,置-20或-70度,可存放一年以上
3真空冻干法:试最理想的保存方法,但需要特殊仪器
二、我一般用甘油管保村法和冻干粉保存法基因工程菌:1:30%的灭菌甘油与培养好的菌悬液按照1:1的比例混合,分装到1
5ML的离心管中,每关1ML,存于--20度,但仅保存半年就不太好了,最好保存到——70度的低温冰箱中
也可用10%的灭菌甘油从斜面上洗下保存
2:菌悬液中加甘露醇和人血白蛋白三、我们实验室保存菌种的方法是:1将菌落穿刺接种在半固体中,如加有琼脂的肉汤培养基,4度存放,保存时间较短一般3-4月2接种菌落的肉汤0
9ml加100%灭菌甘油0
1ml,置-20度冰箱中可以保存一年左右,-70度冰箱或液氮中可放置N年,细胞的保存我们放了近十年,仍然复苏的很好3基因工程菌的保存:为防止基因工程菌质粒丢失或不稳定,保存菌种加入甘油的量应该不大于10%,一般0
9ml的菌液加0
1ml80%高压灭菌甘油-70度冰箱保存四、看见大家说了这么多的保存方法,我说一个我在实验室里自己用的方法:将菌用LB培养过夜(该加什么如抗生素等别忘了哈),取14毫升(这个得根据你的离心机来定夺了)3000转离心,然后加3-4毫升菌种保存液(甘油的量不多,5%而已,你也可以再加大一点)重悬,就行了
再用封口胶封一下,然后放在-20度里
我用这种方法保存的多种菌(包括基因工程菌),一年的时间里都还没有出过问题
值得一提的是,你保存用的菌种管最好是新的,而且煮过最好,这样可以除去一些有机溶剂对菌的影响
五、对于一般的大肠杆菌等基因工程菌,我们室常用的方法是:1、取原种100微升,在3ml适当培养基(2*YT,LB等),加好抗生素,37度摇菌过夜;2、次日取50%甘油(已高压)与培