高效液相色谱-荧光检测法测定环境水中的苯胺和苯酚VIP免费

高效液相色谱-荧光检测法测定环境水中的苯胺和苯酚薛科社!1，董发昕2（1.西北大学环境科学系，西安710069；2.西北大学化学系，西安710069）摘要：建立了用高效液相色谱荧光检测法同时测定环境水中苯胺和苯酚的分析方法。色谱柱为EclipseXDB-C8（4.6mmi.c.X150mm，5!m），流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（0.1mol/L磷酸二氢钾+0.1mol/L磷酸氢二钠，pH6.87）!（甲醇）1!（磷酸盐缓冲液）=50150，流速1.0mL/min，柱温25C，检测波长0min!ex/!em=230/340nm（测定苯胺），3.5min!ex/!em=215/300nm（测定苯酚）。测定苯胺的线性范围0.2~120ng，"=0.9999，检出限0.01ng；测定苯酚的线性范围0.4~500ng，"=0.9998，检出限0.02ng，回收率98.1%~101.2%。该方法已用于对环境水中苯胺和苯酚的测定。关键词：高效液相色谱；荧光检测；苯胺；苯酚；环境水中图分类号：O657.6文献标识码：A文章编号：1000-0720（2004）09-0036-03苯胺是制造染料、药物的主要原料，进入人体后可造成急性或慢性中毒，产生高铁血红蛋白症或神经衰弱、轻度贫血、中毒性皮炎等。苯酚是有机化工工业的基本原料，可通过多种途径对环境水体造成污染，是对人体和水生生物有害的污染物质。测定这2种物质的方法有分光光度法［1，2］、荧光光度法［3］、可变角荧光法［4］和高效液相色谱-紫外检测法［5］等。由于环境样品的物质种类和质量浓度常有很大的变化，特别是废水样品的分析，以上方法有的干扰严重，需要用多种方法和试剂进行分离、操作繁琐、耗时长，有的对这2种物质不能同时测定。本文以高效液相色谱分离，以高选择性的荧光检测器进行检测，通过选用合适的分离条件，并采用检测波长的时间切换，样品不需要前处理，可对苯胺和苯酚同时测定，所用方法未见报道。方法可直接对环境水体中的苯胺和苯酚同时进行分析。1实验部分1.1仪器与试剂Agilent1100高效液相色谱系列（四元梯度泵，FLD，化学工作站）；ORION720A型pH计；AL-01溶剂过滤系统（北京历元公司），AS5150A超声波发生器（北京历元公司）。色谱柱：EclipseXDB-C8柱（4.6mmi.c.X150mm，5!m）；流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液（0.1mol/LKH2PO4+0.1mol/LNa2HPO4，pH6.87）!（甲醇）1!（磷酸盐缓冲液）=50150，用前以0.45!m滤膜过滤，超声脱气；流速：1.0mL/min；柱温：25C；检测波长：0min!ex/!em=230/340nm（测定苯胺），3.5min!ex/!em=215/300nm（测定苯酚）。甲醇为色谱纯，苯胺、苯酚、KH2PO4、Na2HPO4等试剂均为AR级，实验用水为去离子双蒸水。1.2实验方法1.2.1苯胺和苯酚标准溶液配制将新蒸馏的苯胺和苯酚用去离子双蒸水分别配制成1.0mg/mL的标准储备液，避光冷藏。使用时分别稀释或者配制成111混合标准溶液后稀释至所需质量浓度。1.2.2样品测定分别移取1.00mg/mL的苯胺和苯酚标准储备液，配制成质量浓度分别为0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0!g/mL系列混合标准溶液，以选定的色谱条件进样测定，分别绘制苯胺和—63—第23卷第8期2004年8月分析试验室ChineseJournalofAnalysisLaboratoryVol.23.No.8""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""2004-8!收稿日期：2003-09-11；修订日期：2004-01-05基金项目：陕西省教委自然科学基金资助项目（99JK133）作者简介：薛科社（1960-），男，高级工程师苯酚标准曲线。水样去除悬浮物（如出现混浊，离心取清液）进样测定，外标法定量，进样量均为20!L。2结果与讨论2.1分离条件选择苯胺和苯酚在不同pH下的荧光强度各不相同，其原因主要是苯胺和苯酚的化学结构、离解作用对荧光性质有影响。经使用多种流动相，并调整为不同pH试验，以pH6.87磷酸盐缓冲液+甲醇（50150）为流动相，苯胺和苯酚均有较强的荧光。通过与ODS柱对比分析，使用EclipseXDB-C8柱，苯胺和苯酚的分离效果好、色谱峰对称。标准样品及工业废水样品的色谱图见图1。图1苯胺和苯酚标准样品（a）及废水样品（D）色谱图Fig.1Chromatogramofanilinandphenolforstandardsample（a）andwastersample（b）1-苯胺；2-苯酚2.2磷酸盐缓冲液浓度确定本方法对于苯胺和苯酚的检测上限以苯酚计为500ng，进样量为20!L时，最大检测浓度不大于0.268mmOl/L。如待测溶液...