高效液相色谱测定糖化血红蛋白方法的建立与评价VIP免费

第21卷第2期2011年3月江苏大学学报(医学版)JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition)Vo1．21No．2Mar．2011高效液相色谱测定糖化血红蛋白方法的建立与评价涂国华，姜旭淦，李礼，吴亮，逯兆喜，陈盛霞(江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江212013)[摘要]目的：建立高效液相色谱(HPLC)测定糖化血红蛋白(GHb)方法，并对其进行评价。方法：以Bio—Rex70阳离子交换树脂为填料，在HPLC仪上采用梯度洗脱分离测定GHb，对其分析性能进行评价。对5o例健康人和50例糖尿病患者标本中糖化血红蛋白A1c(HbA1e)的含量进行测定。结果：Hb、HbA0和HbA1e的吸收光谱一致，吸收峰均为415nm。该法能使HbA1c与HbA1(a+b)、HbAO清楚分离，HbAIc峰面积或峰高与标本中HbA1c含量成正比。对临床标本测定的变异系数为0．54％～1．15％；平均回收率为97．7％，质控品的实测值在标示值范围内；在0～15．8％范围内线性良好；未见脂血、黄疸对测定的干扰；标本稳定性与保存条件和标本特性有关。健康人和糖尿病患者HbA1c检测结果分别为3．3％～6．1％和6．8％～14．4％。结论：Bio—Rex70一HPLC法测定糖化血红蛋白具有精密度好、准确度高、线性范围宽等优点，可用于GHb或HbA1c常规方法的评价和临床标本的分析。[关键词]糖化血红蛋白；高效液相色谱；离子交换树脂[中图分类号]R446．1[文献标志码]A[文章编号]1671—7783(2011)02～0147—04EstablishmentandevaluationofhighpressureliquidchromatographymethodforglycosylatedhemoglobinmeasurementTUGuo—hua，JIANGXu—gan，L1Li，Liang，LUZhao—xi，CHENSheng—xia(SchoolofMedicalScienceandLaboratoryMedicine，JiangsuUniversity，ZhenjiangJiangsu212013，China)[Abstract]0bjective：Toestablishandevaluateahighpressureliquidchromatography(HPLC)methodfordetermingglyeosylatedhemoglobin(GHb)．Methods：TakingtheBio—Rex70cationexchangeresinasfiller，GHbwasseparatedanddeterminedwithHPLCanalyzerbygradientelution．Theanalysisperform-anceswereevaluated．Meanwhile，theHbA1ccontentsof50healthyand50diabeticpatientssamplesweredetermined．Results：TheabsorptionspectrumsofHb，HbA0andHbA1ewereconsistent，theabsorptionpeakswere415nm．UsingtheHPLCmethodHbA1ccouldbeclearlyseparatedfromHbA1(a+b)andHbA0andHbA1cpeakareaorpeakheightwasproportionaltotheHbA1econtentinsamples．TheCVofclinicalspecimendeterminationwas0．54％～1．15％．Theaveragerecoverywas97．7％．Theactualmeas—uredvaluesofthecontro]swereinrangeofthemarkedvalues．Thelinearitywasgoodintherangeof0～15．8％．Theinterferenceoflipidemiaandjaundiceonthedeterminationhadnotbeobserved．Thespeci—menstabilitywasconcernedwithstorageconditionsandspecimencharacteristics．HbAlcresultsofthehealthypersonsanddiabetespatientswere3．3％～6．1％and6．8％～14．4％respectively．Conclusion：Bio—Rex70-HPLCmethodhasadvantagesofgoodprecision，highaccuracyandwidelinearrange．ItcanbeusedforevaluatingclinicalGHborHbAlcconventionalmethodsandanalyzingclinicalspecimens．[Keywords]glycosylatedhemoglobin；highpressureliquidchromatography；ionexchangeresin糖化血红蛋白(glycosylatedhemoglobin，GHb)是血液中红细胞内血红蛋白(hemoglobin，Hb)与碳水化合物通过非酶促作用形成的化合物。HbA与糖结合部分为HbA1，未结合糖部分为HbA0。根据所结合的碳水化合物不同，GHb分为HbAIal、HbA1a2、HbAIb、HbA1c⋯，其中HbA1c约占HbA1[作者简介]涂国华(1978一)，男，硕士研究生；姜旭淦(通讯作者)，副教授，E—mail：jiangxugan@sohu．con148江苏大学学报(医学版)第21卷的80％，是Hb的一条或两条B链氨基末端与葡萄糖羰基形成的稳定加成化合物。HbA1C的含量与血糖浓度呈明显正相关，能直接反应血糖升高患者近期血糖控制情况，已经成为糖尿病血糖控制的金标准。目前，临床上GHb和HbA1c定量检测方法很多，按原理可分为三大类：①以糖...