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高效液相色谱测定糖化血红蛋白方法的建立与评价VIP免费

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第21卷第2期2011年3月江苏大学学报(医学版)JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition)Vo1.21No.2Mar.2011高效液相色谱测定糖化血红蛋白方法的建立与评价涂国华,姜旭淦,李礼,吴亮,逯兆喜,陈盛霞(江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013)[摘要]目的:建立高效液相色谱(HPLC)测定糖化血红蛋白(GHb)方法,并对其进行评价。方法:以Bio—Rex70阳离子交换树脂为填料,在HPLC仪上采用梯度洗脱分离测定GHb,对其分析性能进行评价。对5o例健康人和50例糖尿病患者标本中糖化血红蛋白A1c(HbA1e)的含量进行测定。结果:Hb、HbA0和HbA1e的吸收光谱一致,吸收峰均为415nm。该法能使HbA1c与HbA1(a+b)、HbAO清楚分离,HbAIc峰面积或峰高与标本中HbA1c含量成正比。对临床标本测定的变异系数为0.54%~1.15%;平均回收率为97.7%,质控品的实测值在标示值范围内;在0~15.8%范围内线性良好;未见脂血、黄疸对测定的干扰;标本稳定性与保存条件和标本特性有关。健康人和糖尿病患者HbA1c检测结果分别为3.3%~6.1%和6.8%~14.4%。结论:Bio—Rex70一HPLC法测定糖化血红蛋白具有精密度好、准确度高、线性范围宽等优点,可用于GHb或HbA1c常规方法的评价和临床标本的分析。[关键词]糖化血红蛋白;高效液相色谱;离子交换树脂[中图分类号]R446.1[文献标志码]A[文章编号]1671—7783(2011)02~0147—04EstablishmentandevaluationofhighpressureliquidchromatographymethodforglycosylatedhemoglobinmeasurementTUGuo—hua,JIANGXu—gan,L1Li,Liang,LUZhao—xi,CHENSheng—xia(SchoolofMedicalScienceandLaboratoryMedicine,JiangsuUniversity,ZhenjiangJiangsu212013,China)[Abstract]0bjective:Toestablishandevaluateahighpressureliquidchromatography(HPLC)methodfordetermingglyeosylatedhemoglobin(GHb).Methods:TakingtheBio—Rex70cationexchangeresinasfiller,GHbwasseparatedanddeterminedwithHPLCanalyzerbygradientelution.Theanalysisperform-anceswereevaluated.Meanwhile,theHbA1ccontentsof50healthyand50diabeticpatientssamplesweredetermined.Results:TheabsorptionspectrumsofHb,HbA0andHbA1ewereconsistent,theabsorptionpeakswere415nm.UsingtheHPLCmethodHbA1ccouldbeclearlyseparatedfromHbA1(a+b)andHbA0andHbA1cpeakareaorpeakheightwasproportionaltotheHbA1econtentinsamples.TheCVofclinicalspecimendeterminationwas0.54%~1.15%.Theaveragerecoverywas97.7%.Theactualmeas—uredvaluesofthecontro]swereinrangeofthemarkedvalues.Thelinearitywasgoodintherangeof0~15.8%.Theinterferenceoflipidemiaandjaundiceonthedeterminationhadnotbeobserved.Thespeci—menstabilitywasconcernedwithstorageconditionsandspecimencharacteristics.HbAlcresultsofthehealthypersonsanddiabetespatientswere3.3%~6.1%and6.8%~14.4%respectively.Conclusion:Bio—Rex70-HPLCmethodhasadvantagesofgoodprecision,highaccuracyandwidelinearrange.ItcanbeusedforevaluatingclinicalGHborHbAlcconventionalmethodsandanalyzingclinicalspecimens.[Keywords]glycosylatedhemoglobin;highpressureliquidchromatography;ionexchangeresin糖化血红蛋白(glycosylatedhemoglobin,GHb)是血液中红细胞内血红蛋白(hemoglobin,Hb)与碳水化合物通过非酶促作用形成的化合物。HbA与糖结合部分为HbA1,未结合糖部分为HbA0。根据所结合的碳水化合物不同,GHb分为HbAIal、HbA1a2、HbAIb、HbA1c⋯,其中HbA1c约占HbA1[作者简介]涂国华(1978一),男,硕士研究生;姜旭淦(通讯作者),副教授,E—mail:jiangxugan@sohu.con148江苏大学学报(医学版)第21卷的80%,是Hb的一条或两条B链氨基末端与葡萄糖羰基形成的稳定加成化合物。HbA1C的含量与血糖浓度呈明显正相关,能直接反应血糖升高患者近期血糖控制情况,已经成为糖尿病血糖控制的金标准。目前,临床上GHb和HbA1c定量检测方法很多,按原理可分为三大类:①以糖...

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