磷脂酰胆碱反应体系的建立VIP专享VIP免费

1212西南农业学报SouthwestChinaJournalofAgriculturalSciences2013年26卷3期V0I．26No．3文章编号：1001—4829(2013)03—1212—06磷脂酰胆碱反应体系的建立卞欢，王道营，张牧晗，徐为民，刘芳，诸永志，蒋宁，曹建民(江苏省农业科学院农产品加工研究所，江苏南京210014)摘要：采用2一油酸-1一棕榈酸磷脂酰胆碱为表面活性剂、低级醇为助表面活性剂、异辛烷为油相、蒸馏水为水相，以伪三元相图微乳面积大小为指标，考察磷脂酰胆碱微乳体系。结果表明，磷ill正丙醇／异辛烷／水W／O微乳体系、磷脂／正丁醇／异辛烷／水W／O微乳体系以及磷脂／正丙醇／异辛烷／水o／w微乳体系均为稳定的磷脂酰胆碱微乳体系。3种微乳体系和脂质体分别与鸭肉肌内磷脂酶振荡反应10h后，采用TLC联用QuantityOne软件鉴定反应产物中的脂肪酸，以脂肪酸斑点分析的TraceQty值为指标，最终确定磷脂酰胆碱反应体系。因此，以脂质体作为反应体系所产生的脂肪酸最多，即脂质体为磷脂酰胆碱最佳反应体系。为进一步研究磷脂酰胆碱的酶解机制和磷脂酶的分离纯化提供技术方法。关键词：磷脂酰胆碱；磷脂酶；微乳；脂质体中图分类号：S858．3文献标识码：AEstablishingReactionSystemofPhosphatidylcholineB1ANHuan，WANGDao—ying’，ZHANGMu·han，XUWci—rain，LIUFang，ZHUYong—zhi，JIANGNing，CAOJian—min(InstituteofAculturalProductsProcessing，JiangsuAcademyofAculturalSciences，JiangsuNanjing210014，China)Abstract：111edesiredmicroemulsionswerepreparedbymixingisooctaneasorganicphase。distilledwateraSwaterphase，2-oleoyl-1一palmi—toyl·sn—glycero-3一phosphocholineassolvent，lowcarbonalcoholsasCO·solvents．Thesizeofmicroemulsionregionofthepseudo-ternaryphasediagramWasusedasthestableindexofmicroemulsiontostudy．phosphatidylcholinemicroemulsionsystems．Theresultsshowedthatphos·phatidyleholine／n·propanol／isoectaneW／Omieroemulsion，phosphatidylcholine／n·butanol／isooctaneW／Omieroemulsion，phosphatidyl·choline／n—propanol／isooctaneo／Wmicrecmulsionwereallstablesystems．Threemicroemulsionsystemsandliposomewereintouchwiththeintramuscularphospholipaseextractedfromduckmu~31erespectively．andthereactiontimewastenhours．FaRyacidscontentsasthemainhydrolysateswereidentifiedwithTractQtybyTLCandQuantityOnetoestimatetheoptimalphosphatidylcholinereactionsystem．Itshowedthatthegenerationoffatt7acidsWaSmol'~frequentlyinliposome8sreactionsystem．Finally．1iposomeWaSdeterminedasphosphatidylcholinereactionsystemtosetupatechnicalmethodforpurificationandcharacterizationofphospholipaseandthemechanismofphospholipidhydroly-sis．Keywords：Pbosphatid3rlcholine；Phospholipase；Miereemulsion；Liposome水解鸭肉肌内磷脂的内源酶主要有磷脂酶和脂肪酶，其中磷脂酶可分为磷脂酶A。、磷脂酶A：、磷脂酶c和磷脂酶D；脂肪酶按最适pH可分为酸性脂肪酶、中性脂肪酶和碱性脂肪酶。由于磷脂酶和脂肪酶催化作用发生在油水界面上，是典型的界面酶，收稿日期：2012一l1—12基金项目：国家自然科学基金资助项目(31271891)；江苏省自然科学基金(BK2012785)；江苏省农业自主创新资金(cx(11)4028)作者简介：卞欢(1987一)，男，江苏盐城人，硕士，从事肉品加工与质量控制研究，E—mail：xuehanjaas@yahoo．com．cn，为通讯联系人。所以需要建立一个能在体系中建立良好反应界面的磷脂酰胆碱反应体系。磷脂酰胆碱反应体系主要可分为缓冲水溶液、有机溶液、微乳和囊泡⋯。目前微乳体系和囊泡体系的研究很多，由于PC的两亲性，所以能形成微乳和囊泡体系，进而增加PC和酶的接触面积，使反应速率提升。微乳是由美国化学工程师Rodawaid在1928年研制皮革光亮剂时意外发现的，随后在1943年Hoar和Schulman证实了这种“透明乳状液”是大小为8—80nm的球形或圆柱形颗粒构成的分散体系，直到1958年Schulman才给它定名为微乳(Microemulsio...