2基因工程的基本操作程序学习目标:①写出基因工程的四个操作步骤
②解释基因文库、基因组文库、部分基因文库的区别与联系
③分析基因工程四个步骤的原理、工具及具体的操作程序
学习重难点基因工程基本操作程序的四个步骤
学习难点从基因文库中获取目的基因;利用PCR技术扩增目的基因
学习过程:基因工程的基本操作程序:基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:、、、
(一)目的基因的获取获取目的基因的方法:(1)从中获取目的基因:①基因文库:将含有某种生物的许多DNA片段,导入受体菌的中储存,各个受体菌分别含有这种生物的,称为基因文库
基因文库可大可小,如果它包含了一种生物所有的基因,就叫;如果它只包含一种生物的一部分基因,就叫,如
②具体方法:可根据基因的序列、基因的、基因在上的位置、基因的转录产物以及基因翻译产物等特性来获取目的基因
(2)利用扩增目的基因:原理:前提:过程:(二)基因表达载体的构建(基因工程的核心)(1)目的:(2)组成:①启动子:是一段有特殊结构的,位于基因的,是识别和结合的部位,能驱动基因,最终获得所需的
②终止子:也是一段有特殊结构的,位于基因的
③标记基因的作用:;常用的标记基因是
(三)将目的基因导入受体细胞(1)转化的概念:(2)常用的转化方法:①将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是,其次还有和等
用心爱心专心1②将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是
此方法的受体细胞是
③将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是,最常用的原核细胞是,其转化方法是:先用处理细胞,使其成为,再将溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程
(四)目的基因的检测与鉴定(1)首先要检测,方法是采用
(2)其次还要检测,方法是采用
(3)最后检测,方法是从转基因生物中提取,用相应的进行杂交
(4)有时还需进行的鉴定