荧光定量PCR常见问题1.定量PCR仪的开关机顺序是怎样的？按照正确的开关机顺序操作，有助于延长仪器的使用寿命，减少仪器出故障的频率。开机顺序：先开电脑，待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机，等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件，进行实验。关机顺序：确认实验已经结束后，首先关闭信号收集软件，然后关掉定量PCR仪主机的电源，最后关闭电脑。2.哪些种类的反应管和盖子适合定量PCR实验使用？有何需要注意的地方？定量PCR实验可以使用以下耗材:96孔光学反应板配合光学膜,0・2ml光学八联反应管配合光学膜，0・2ml光学八联反应管配合平盖的光学八联管盖。ABI公司生产的定量PCR耗材的具体使用方法和货号见下表：反应管上机样品支架盖子或膜96孔光学反应板96-WellOpticalReactionPlate(P/N4306737)7000型桶PCR佟将96孔板直接ScA.Block中；其他型号的定壘PCR仪:使用随机配备的96孔板支衆-OpticalAdhesiveCover(P/N431197i>或ABIPRISMOpticalCaps?.&CapsZStrip(FlatCaps)'(P/N4323032)--.［联管MicroAtripStripReactionTube(P/NN801-053.0!)孔叩型定奉兀罠仪：使用MicroAmp96-WellTray/RetainerSets(P/N403081J；；-7300/7500型帛奉PCR仪：使用［随机配备的单管支衆-OpticalAdhesiveCover(P/N4311971)或ABIPRISM®OpticalCaps,8CapsZStrip(FlatCap^J(P/N4323032).带盖单宅离心管MicroAmpReactionTubeswithCap(P/NN801-0540)同上-OpticalAdhesiveCover(P/N4311971)注意:先剪掉■■誇盖后■，冉用光学膜或八联平盖密封-带盖光学离心管MicroAmpOpticalTube(P/NN801-0933)MicroAmp96-WellTrayforTubeswithCaps(P/NNS01-0541)3.为什么要定期对电脑进行磁盘碎片整理？怎样整理？当运行实时定量PCR仪及使用软件分析实验结果时，计算机会删除并创建若干文件，计算机硬盘的空闲空间会被分割成越来越多的小块。当硬盘驱动器上文件以分解的碎片存储时，程序需要更长的时间才能存取文件，因为必须多次寻找文件碎片以存取不同的片断。碎片整理实用程序将一个文件分解开的多个碎片合并在一起，并存储到硬盘的同一个位置，从而清除文件碎片，进而优化系统性能。碎片整理的方法如下：•在Windows桌面上，选择开始（start），我的电脑（Mycomputer）。•在（我的电脑）窗口中，用鼠标右键单击硬盘驱动器，并选择（属性）propertyo•在（属性）对话框中选择工具（Tools）选项卡，单击开始整理（Defragmentnow）。•单击碎片整理（Defragment）。•当显示“碎片整理完毕”对话框时，单击（确定）。•在“本地磁盘属性”对话框中，单击（确定）。为计算机机中剩余的驱动器重复如上步骤。4.何时执行windowsservicepack更新？不要执行该操作。除非美国应用生物系统公司代表通知您更新操作系统，否则请不要更新控制定量PCR仪的计算机的操作系统。新版本的MicrosoftWindows操作系统有可能与SDS软件存在冲突，并导致仪器不能正常运行。如果您希望安装servicepack（更新包）以更新操作系统，应查看随SDS软件提供的版本说明，避免兼容性问题。5.应该备份哪些数据？应该定期备份您的实验数据，备份频率推荐每周一次，用光盘刻录。同时您也应该备份定量PCR仪的各种纯荧光光谱校正文件、背景文件和安装验证实验数据，这些文件所在的目录是C：/Appliedbiosystems/SDSDocument。下图是校正文件的样本。««1対|翹1过給90SU.X(ksent炉蹲12:45AMV|Backrirai1d25G2(M,5ii5弓啓SC5vi^DceLmen-炉砂12:35AM二摘'血1L2J53AM19t：BECSvJ-5(Doament涸轴L;04酬32烷dx^coment養阳L:22AF：岂P'jejptetfa丄馆，蛀:懾胚创上抚AMHPtiNpoctr白_F刪.sdsttKBSDSvI.^tw-ireht址5砂*[Pu&5pecfifl_P0X.5tls46灼或5也际imeM涸：m卜:30酗frjPueSpediaJAMRAjds46KB開oimsrit边5阳L：弟邮酬逐JSKfH.sds620t：BJC6vllutK'-menJ湄砂3:西AM6.怎么样的实验室环境才能保证仪器设备正常运行？良好的实验室环境有助于延长仪器的使用寿命，减少仪器出故障的频率。推荐做到以下几个方面：电源：推荐配备合适的UPS或稳压器。通风：仪器的通风应该没有阻挡。温度：推荐实验室配备空调，温度应该控制在10-30°C之间。湿度：20-80%；对于潮湿的...
