一、动物细胞培养1、动物细胞培养液(液体培养基)成分特点2、培养过程3、原代培养与传代培养4、细胞株与细胞系(其他动物细胞工程技术的基础)原代培养原代培养中出现的能够传代培养40~50代的细胞细胞株中变异产生的能无限传代培养的细胞幼龄动物剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养取材含有萄葡糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
传代培养细胞悬浮液细胞株细胞系如出现的无限传代细胞原代培养传代培养传代培养二、动物细胞融合与植物原生质体融合基本相同1、原理与方法:2、过程3、用途:最重要的用途是制备单克隆抗体灭活病毒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接形成杂种细胞病毒颗粒细胞核三、单克隆抗体(用灭活病毒诱导动物细胞融合为例说明)5、动物细胞培养的应用生产生物制品、器官移植、有毒物质检测等
1、传统的抗体制备方法及问题(1)方法:(2)问题:2、单克隆抗体:3、单克隆抗体的制备过程抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞细胞融合、筛选细胞培养选出能产生特定抗体的细胞群培养体外培养单克隆抗体体内培养4、单克隆抗体的应用将抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出抗体
产量低、特异性差,纯度低,反应不够灵敏
指由单个B细胞进行无性繁殖(克隆)形成细胞群,由这种细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体
不能无限增殖哺乳动物的胚胎移植1、方法过程(以良种牛的繁殖为例)良种母牛多排卵良种公牛取出卵细胞体外受精取出精子受精卵胚胎适于受孕母牛子宫激素处理2、意义提高良种动物的繁殖速度
在疾病诊断、治疗和预防方面与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高