第一章基因工程基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品。基础理论和技术的发展催生了基因工程阅读课本第2页1.1DNA重组技术的基本工具是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品分析概念：工具为什么要加工什么是表达用什么导入基因操作的工具基因的剪刀（分子手术刀）——限制性核酸内切酶（限制酶）基因的针线（分子缝合针）——DNA连接酶基因的运输工具（分子运输车）——运载体到哪里去寻找这种酶（1）限制酶①分布：主要在原核生物中。②作用特点:专一性，识别特定核苷酸序列，切割特定切点。③结果：产生黏性未端和平末端④举例：EcoR1限制酶、Sma1限制酶与我们学过的DNA酶相同吗？识别序列的特点作用是什么两者的区别这两种酶切的特点切断的是什么键限制酶的识别特点以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列如：GAATTCCCCGGGCTTAAGGGGCCC黏性末端黏性末端EcoRI•什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？被限制酶切开的被限制酶切开的DNADNA两条单链的切口，两条单链的切口，带有几个带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸，他们之间正好，他们之间正好互互补配对补配对，这样的切口叫，这样的切口叫黏性末端黏性末端。。•要想获得某个特定性状的基因必须要用限制要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？酶切几个切口？可产生几个黏性末端？要切要切两个两个切口，产生切口，产生四个黏性末端四个黏性末端。。•如果把两种来源不同的如果把两种来源不同的DNADNA用同一种限制酶用同一种限制酶来切割，会怎样呢？来切割，会怎样呢？会产生会产生相同的黏性末端相同的黏性末端，然后让两，然后让两者的黏性末端者的黏性末端黏合黏合起来，就似乎可以合成重起来，就似乎可以合成重组的组的DNADNA分子了。分子了。基因的针线：DNA连接酶GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG同种限制酶切割（2）DNA连接酶①连接的部位：磷酸和脱氧核糖之间的键：磷酸二酯键（梯子的扶手）②结果：将两个相同的未端的连接。③分类：E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶与DNA聚合酶相同吗二者在性质上的区别•基因的针线基因的针线————DNADNA连接酶连接酶DNADNA连接酶连接酶可把黏性末端可把黏性末端之间的缝之间的缝隙隙““缝合缝合”起来，即把梯子两边扶手的”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来断口连接起来((形成形成磷酸二酯键磷酸二酯键))，这样，这样一个重组的一个重组的DNADNA分子就形成了。分子就形成了。（3）运载体①作用：将外源基因送入受体细胞。②具备的条件：能在宿主细胞内复制，并稳定地保存有多个限制酶切点，具有某些标记基因，对受体细胞无害③举例：质粒（常用）、噬菌体和动植物病毒。为什么要具备这些条件与外源基因连接。与外源基因连接。便于进行便于进行筛选筛选质粒特点：质粒特点：1、细菌染色体外双链环状DNA分子2、能自我复制并在受体细胞中稳定存在3、有一个或多个限制酶切点4、有特殊的遗传标记基因注意：真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。11）以下说法正确的是（））以下说法正确的是（）AA、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列酸序列BB、质粒是基因工程中唯一的运载体、质粒是基因工程中唯一的运载体CC、运载体必须具备的条件之一是：具有多、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接个限制酶切点，以便与外源基因连接DD、基因控制的性状都能在后代表现出来、基因控制的性状都能在后代表现出来CC练习练习22）不属于质粒被选为基因运载体的理由是）不属于质粒被选为基因运载体的理由是AA、能复制（）、能复制（）BB、有多个限制酶切点、有多个限制酶切点...
